Thermo Fisher, A14603, Kit de clonación y ensamblaje GeneArt™ Seamless PLUS

Kit de clonación y ensamblaje GeneArt™ Seamless PLUS. Al igual que nuestro kit de clonación y ensamblaje Seamless de primera generación, el kit GeneArt™ Seamless PLUS es el kit completo para la clonación simultánea y direccional de 1 a 4 fragmentos de PCR, compuestos por cualquier secuencia, en cualquier vector linealizado, en una sola reacción de 30 minutos o menos a temperatura ambiente. Sin embargo, Seamless PLUS ofrece varias ventajas sobre los kits anteriores:
• Mayor eficiencia: opción de preclonación para fragmentos grandes para una mayor eficiencia de clonación.
•Construcciones más grandes: crea construcciones de hasta 40 kb
•Versatilidad: vector conjugativo de amplio rango y alta capacidad que se replica en la mayoría de las bacterias Gram negativas. Las mejoras anteriores se combinan con estos beneficios clave compartidos por todos los kits de clonación y ensamblaje sin costuras GeneArt™:
•Velocidad y facilidad: clone hasta 4 fragmentos de ADN, con la secuencia que elija, simultáneamente en un solo vector; no requiere sitios de restricción de digestión, ligadura o recombinación.
• Precisión y eficiencia: diseñadas para permitirle clonar lo que quiera, donde quiera, en la orientación que quiera y lograr hasta un 90 % de clones correctos sin dejar secuencias adicionales.
• Herramientas gratuitas: diseñe su construcción final y oligos de ADN in silico utilizando nuestra herramienta gratuita basada en la web que lo guía paso a paso a través de su proyecto.
•Flexibilidad vectorial: utilice nuestro vector lineal o un vector de su elección
Diversas aplicaciones: agilice diversas técnicas de biología sintética y molecular mediante la rápida combinación, adición, deleción o intercambio de segmentos de ADN. Para la clonación de más de 4 fragmentos de ADN o para moléculas finales de más de 110 kb, considere el sistema de ensamblaje genético de alto orden GeneArt™. Creación de clones sencilla y rápida. La clonación GeneArt™ Seamless PLUS es un proceso simple de dos pasos que consiste en el ensamblaje in vitro seguido de la transformación en E. coli competente One Shot™ DH10B™ T1R SA. El kit emplea una mezcla patentada de enzimas y tampones para ensamblar fragmentos de ADN con homología terminal compartida, sin secuencias ni cicatrices adicionales en la construcción final («sin fisuras»). La homología terminal se incorpora fácilmente mediante amplificación por PCR con oligonucleótidos de ADN personalizados, diseñados con nuestra herramienta web gratuita. Eficiencia, flexibilidad y precisión de clonación. Con el kit de clonación y ensamblaje GeneArt™ Seamless PLUS, los principales factores que influyen en la eficiencia de la clonación son el tamaño de los fragmentos de ADN (de 100 pb a 10 kb), el tamaño total de la molécula final (≤ 40 kb) y la calidad y especificidad de cada fragmento. Eficiencias de clonación típicas para diferentes números de fragmentos:
• >95% para 4 fragmentos, 5 Kb cada uno
• >90% para 4 fragmentos de 10 Kb cada uno. El éxito de la clonación es independiente de la secuencia del inserto y del tipo de vector, lo que permite diseñar y añadir prácticamente cualquier secuencia o combinación de secuencias deseada a cualquier plásmido, siempre que pueda linealizarse mediante digestión con enzimas de restricción o PCR. Los clones circularizados obtenidos de la reacción contienen únicamente la secuencia de su vector original, insertos y homologías designadas, sin inserciones de nucleótidos extraños. Soporte de diseño in silico. Un paso clave en la clonación GeneArt™ Seamless PLUS es el diseño correcto de fragmentos y oligonucleótidos con la homología y el espaciado adecuados para garantizar el ensamblaje exitoso de su clon. Ofrecemos una herramienta en línea gratuita, la Herramienta de Diseño GeneArt™ para Ensamblaje y Mutagénesis Seamless o de Alto Orden, para ayudarle a diseñar su experimento in silico. La herramienta verifica la compatibilidad del diseño experimental con las especificaciones del producto, diseña oligonucleótidos de ADN con homología terminal para la amplificación por PCR de los diferentes elementos a clonar y presenta al usuario una representación gráfica del vector, así como una secuencia anotada descargable en formato GenBank, compatible con el software Vector NTI™. Aplicaciones: El kit de clonación y ensamblaje GeneArt™ Seamless PLUS está diseñado para facilitar la clonación y el ensamblaje de ADN en una amplia gama de aplicaciones de biología molecular y biología sintética, entre otras. El producto permite la creación de vectores de expresión modulares, con componentes intercambiables, y puede utilizarse para realizar diversas tareas que, de otro modo, implicarían múltiples pasos. Utilice el kit para construir proteínas de fusión; eliminar, reemplazar o añadir elementos de ADN, como sitios de restricción, en un vector existente; y realizar muchas otras técnicas que requieren la manipulación de secuencias genéticas. Cepa bacteriana o de levadura: DH10B.
Tipo de célula: E. coli químicamente competente
Método de clonación: Clonación sin fisuras
Para usar con (aplicación): Clonación
Número de fragmentos: hasta 4 fragmentos
Tipo de producto: Kit de clonación y montaje
Cantidad: 20 Reacciones
Tamaño: 40 kb en total (vector más todas las inserciones)
Vector: pUC19L linealizado, pYES7L linealizado
Paso del flujo de trabajo: Ensamblaje del ADN
Formato: Kit
Tamaño de la unidad: cada una