Thermo Fisher, A20106, Alexa Fluor™ 647 NHS Ester (éster de succinimidilo)

Alexa Fluor™ 647 de 5 mg es un colorante rojo lejano brillante y fotoestable, con una excitación ideal para la línea láser de 633 nm. Utilizado para la generación de señales estables en imagenología y citometría de flujo, el colorante Alexa Fluor™ 647 es soluble en agua e insensible al pH de 4 a 10. La fluorescencia de este colorante Alexa Fluor™ de longitud de onda larga no es visible para el ojo humano, pero la mayoría de los sistemas de imagenología lo detectan fácilmente. Además de formulaciones de colorantes reactivos, ofrecemos el colorante Alexa Fluor™ 647 conjugado con diversos anticuerpos, péptidos, proteínas, trazadores y sustratos de amplificación, optimizados para el marcaje y la detección celular (más información).
El éster NHS (o éster succinimidílico) de Alexa Fluor™ 647 es la herramienta más popular para conjugar este colorante con una proteína o anticuerpo. Los ésteres NHS pueden utilizarse para marcar las aminas primarias (R-NH₂) de proteínas, oligonucleótidos modificados con aminas y otras moléculas que contienen aminas. El conjugado resultante de Alexa Fluor™ exhibirá una fluorescencia más brillante y mayor fotoestabilidad que los conjugados de otros fluoróforos espectralmente similares.
Información detallada sobre este éster NHS AlexaFluor™: Etiqueta fluorófora: Colorante Alexa Fluor™ 647. Grupo reactivo: Éster NHS. Reactividad: Aminas primarias en proteínas y ligandos, oligonucleótidos modificados con amina. Ex/Em del conjugado: 651/672 nm. Coeficiente de extinción: 270.000 cm-1 M-1. Colorantes espectralmente similares: Cy5™. Peso molecular: ∼1250. Reacción de conjugación típica: Se pueden conjugar reactivos con amina con prácticamente cualquier proteína o péptido (el protocolo proporcionado está optimizado para anticuerpos IgG). Se puede escalar la reacción para cualquier cantidad de proteína, pero la concentración de proteína debe ser de al menos 2 mg/ml para obtener resultados óptimos. Recomendamos probar tres grados diferentes de marcaje, utilizando tres proporciones molares diferentes de reactivo a proteína.
El éster NHS Alexa Fluor™ normalmente se disuelve en dimetilformamida anhidra (DMF) o dimetilsulfóxido (DMSO) de alta calidad (D12345), y la reacción se lleva a cabo a 0.
1–0.
Tampón de bicarbonato de sodio 2 M, pH 8.
3, a temperatura ambiente durante 1 hora. Dado que el pKa de la amina terminal es menor que el del grupo épsilon-amino de la lisina, se puede lograr un marcaje más selectivo del extremo amino utilizando un tampón con un pH más cercano a la neutralidad.
Consulte el manual del usuario para obtener instrucciones de solubilidad.
Purificación del conjugado: Los anticuerpos marcados se separan típicamente del colorante Alexa Fluor™ libre mediante una columna de filtración en gel, como Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 o equivalente. Para proteínas de mayor o menor tamaño, seleccione un medio de filtración en gel con un punto de corte de peso molecular adecuado o purifique mediante diálisis. Ofrecemos varios kits de purificación optimizados para diferentes cantidades de conjugado de anticuerpo: Kit de purificación de conjugado de anticuerpo para 0.
5-1 mg (A33086) Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 20-50 μg (A33087) Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 50-100 μg (A33088) Más información sobre el marcaje de proteínas y anticuerpos. Ofrecemos una amplia selección de kits de marcaje de anticuerpos y proteínas Molecular Probes™ que se adaptan a su material de partida y a su configuración experimental. Consulte nuestros kits de marcaje de anticuerpos o utilice nuestra herramienta de selección de productos químicos de marcaje para conocer otras opciones. Para obtener más información sobre nuestros kits de marcaje, lea la sección 1 sobre "Kits para el marcaje de proteínas y ácidos nucleicos".
2 en el Manual de Sondas Moleculares™.
Si no encuentra lo que busca en nuestro catálogo en línea, le prepararemos un conjugado de anticuerpos o proteínas personalizado. Nuestro servicio de conjugación personalizado es eficiente y confidencial, y garantizamos la calidad de nuestro trabajo. Contamos con la certificación ISO 13485:2000.
Emisión: 672 nm
Excitación: 651 nm
Para usar con (aplicación): química de etiquetado, etiquetado de proteínas y reticulación
Etiqueta o tinte: Alexa Fluor™ 594
Peso molecular (g/mol): ∽1250 kDa
Tipo de producto: Éster NHS (éster succinimidílico)
Pureza: 98% a 647 nm (HPLC)
Cantidad: 5 mg
Color: Azul
Rango de pH: 4 a 10
Tamaño de la unidad: cada una