Thermo Fisher, A29377, Kit de síntesis de ARNg de precisión

Kit de Síntesis de ARNg de Precisión. El Kit de Síntesis de ARNg de Precisión es un sistema completo para la síntesis rápida de ARN guía (ARNg) listo para formar complejos con la Proteína Cas9 v2 TrueCut™ para obtener ribonucleoproteína Cas9/ARNg (RNP Cas9) lista para la transfección. Este formato de RNP Cas9, junto con nuestra Proteína Cas9 v2 TrueCut, se ha probado en diversas líneas celulares en suspensión y adherentes, con una eficiencia de escisión superior al 70 % y sin indicios de toxicidad. A partir de dos oligonucleótidos monocatenarios cortos que codifican la secuencia diana, la plantilla de ARNg se ensambla con un promotor T7 en una reacción de PCR corta de un solo paso. El producto ensamblado se utiliza como plantilla en una reacción de transcripción in vitro (IVT), seguida de una purificación rápida, obteniendo ARNg listo para la transfección en tan solo cuatro horas. El ARNg resultante también puede cotransfectarse con nuestro ARNm de nucleasa CRISPR Invitrogen™, listo para transfectar. Tanto los formatos de proteína como de ARNm Cas9 no requieren manipulación de plásmidos, por lo que son compatibles con métodos de ingeniería celular de alto rendimiento y multiplexación de todo el genoma.
Las características del kit de síntesis de ARNg de precisión incluyen: Ensamblaje y síntesis rápidos de cualquier ARNg diana en tan solo cuatro horas, incluyendo el ensamblaje de la plantilla. Alto rendimiento (>10 µg) y alta concentración (>200 ng/µl) de ARNg. Cómo obtener una secuencia de ARNg. La edición genómica con tecnología CRISPR requiere un ARN guía no codificante (ARNg) para escindir el ADN genómico en la secuencia diana de interés. El ARNg tiene dos componentes moleculares: un ARN CRISPR específico de la diana (ARNcr) y un ARNcr transactivador (ARNtracr), que se han combinado en un único transcrito. La secuencia diana (20 bases) debe estar inmediatamente aguas arriba de un motivo PAM (NGG) que permite que la Cas9 inicie la unión. El PAM se encuentra únicamente en el ADN diana y no forma parte de la secuencia CRISPR específica de la diana. El ARNg y el motivo PAM guían la nucleasa Cas9 a la secuencia genómica objetivo para formar un complejo y crear una rotura roma de ADN de doble cadena (DSB) tres nucleótidos antes del sitio PAM.
Utilice nuestra herramienta de búsqueda y diseño CRISPR para buscar en nuestra base de datos de más de 600.000 secuencias de ARNg específicas para cada gen del genoma humano y murino. Los ARNg prediseñados de Invitrogen están optimizados para la inactivación génica y suelen dirigirse a los tres primeros exones transcritos por gen. Los resultados de la búsqueda incluyen recomendaciones basadas en la minimización de posibles efectos no deseados, posibles sitios de unión y mapas de exones con la ubicación de los ARNg. Esta herramienta también permite analizar cualquier secuencia de interés para diseñar secuencias CRISPR únicas.
Cómo producir ARNg. Una vez seleccionadas las secuencias de ARNg, elija entre tres opciones para producir ARNg: ARN guía sintético TrueGuide: elija entre nuestro catálogo de ARNg prediseñados o cargue su secuencia a nuestra herramienta de pedidos de ARNg TrueGuide. Kit de síntesis de ARNg de precisión (esta página): obtenga ARNg listo para la transfección en tan solo cuatro horas, incluyendo el ensamblaje de la plantilla. Servicios de ingeniería genómica: ahorre tiempo y esfuerzo y deje que nuestro equipo de servicios personalizados diseñe, sintetice y purifique secuencias de ARNg transcritas in vitro (IVT) para usted. Para solicitar un presupuesto o realizar un pedido, comuníquese con nuestro departamento de Servicios Personalizados al 1-800-955-6288 x45682 o a gemservices@thermofisher.
com.
Concentración: 200 ng/μL
Tipo de producto final: ARN
Formato: Kit
Número de reacciones: 25 reacciones
Tipo de producto: Kit de síntesis de ARNg
Promotor: T7
Cantidad: 25 reacciones
Condición de envío: Aprobado para envío a temperatura ambiente o en hielo húmedo o seco.
Material de partida: Oligos (ADN)
Suficiente para: 25 reacciones
Técnica: CRISPR-Cas9
Rendimiento: >10 μg a >200 ng/μL de ARNg
Forma: Líquido
Velocidad de reacción: rápida
Tamaño de la unidad: cada una