Thermo Fisher, A37574, Alexa Fluor™ 680 NHS Ester (éster de succinimidilo)

3 x 100 μg Alexa Fluor™ 680 es un colorante brillante y fotoestable en el infrarrojo cercano que es espectralmente similar al Cy5.
5 colorantes. Utilizado para la generación de señales estables en imágenes y citometría de flujo, el colorante Alexa Fluor™ 680 es soluble en agua e insensible al pH de 4 a 10. La fluorescencia de este colorante Alexa Fluor™ de longitud de onda larga no es visible para el ojo humano, pero la mayoría de los sistemas de imágenes lo detectan fácilmente. Además de formulaciones de colorantes reactivos, ofrecemos el colorante Alexa Fluor™ 680 conjugado con diversos anticuerpos, péptidos, proteínas, trazadores y sustratos de amplificación optimizados para el marcaje y la detección celular (más información).
El éster NHS (o éster succinimidílico) de Alexa Fluor™ 680 es la herramienta más popular para conjugar este colorante con una proteína o un anticuerpo. Los ésteres NHS pueden utilizarse para marcar las aminas primarias (R-NH₂) de proteínas, oligonucleótidos modificados con aminas y otras moléculas que contienen aminas. El conjugado resultante de Alexa Fluor™ exhibirá una fluorescencia más brillante y mayor fotoestabilidad que los conjugados de otros fluoróforos espectralmente similares.
Información detallada sobre este éster NHS AlexaFluor™:Etiqueta de fluoróforo:Colorante Alexa Fluor™ 680Grupo reactivo:Éster NHSReactividad:Aminas primarias en proteínas y ligandos, oligonucleótidos modificados con aminaEx/Em del conjugado:684/707 nmCoeficiente de extinción:183 000 cm-1M-1Colorantes espectralmente similares:Cy5.
5. Reacción de conjugación típica. Se pueden conjugar reactivos amino-reactivos con prácticamente cualquier proteína o péptido (el protocolo proporcionado está optimizado para anticuerpos IgG). Se puede escalar la reacción para cualquier cantidad de proteína, pero la concentración de proteína debe ser de al menos 2 mg/mL para obtener resultados óptimos. Recomendamos probar tres grados diferentes de marcaje, utilizando tres proporciones molares diferentes de reactivo/proteína.
El éster NHS Alexa Fluor™ normalmente se disuelve en dimetilformamida anhidra (DMF) o dimetilsulfóxido (DMSO) de alta calidad (D12345), y la reacción se lleva a cabo a 0.
1–0.
Tampón de bicarbonato de sodio 2 M, pH 8.
3, a temperatura ambiente durante 1 hora. Dado que el pKa de la amina terminal es menor que el del grupo épsilon-amino de la lisina, se puede lograr un marcaje más selectivo del extremo amino utilizando un tampón con un pH más cercano a la neutralidad.
Purificación del conjugado: Los anticuerpos marcados se separan típicamente del colorante Alexa Fluor™ libre mediante una columna de filtración en gel, como Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 o equivalente. Para proteínas de mayor o menor tamaño, seleccione un medio de filtración en gel con un punto de corte de peso molecular adecuado o purifique mediante diálisis. Ofrecemos varios kits de purificación optimizados para diferentes cantidades de conjugado de anticuerpo: Kit de purificación de conjugado de anticuerpo para 0.
5-1 mg (A33086) Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 20-50 μg (A33087) Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 50-100 μg (A33088) Más información sobre el marcaje de proteínas y anticuerpos. Ofrecemos una amplia selección de kits de marcaje de anticuerpos y proteínas Molecular Probes™ que se adaptan a su material de partida y a su configuración experimental. Consulte nuestros kits de marcaje de anticuerpos o utilice nuestra herramienta de selección de productos químicos de marcaje para conocer otras opciones. Para obtener más información sobre nuestros kits de marcaje, lea la sección 1 sobre "Kits para el marcaje de proteínas y ácidos nucleicos".
2 en el Manual de Sondas Moleculares™.
Si no encuentra lo que busca en nuestro catálogo en línea, le prepararemos un conjugado de anticuerpos o proteínas personalizado. Nuestro servicio de conjugación personalizado es eficiente y confidencial, y garantizamos la calidad de nuestro trabajo. Contamos con la certificación ISO 13485:2000.
Emisión: 707 nm
Excitación: 684 nm
Tipo de producto: Tinte
Cantidad: 3 x 100 μg
Condición de envío: Temperatura ambiente
Línea de productos: Alexa Fluor™
Tamaño de la unidad: cada una