Thermo Fisher, A39553, Kit cuantitativo de endotoxinas cromogénicas Pierce™

240 Reacciones. La endotoxina es un lipopolisacárido (LPS) que constituye gran parte de la membrana externa de la pared celular en bacterias gramnegativas. El LPS es el antígeno más abundante en la superficie celular de la mayoría de las bacterias gramnegativas. El kit cromogénico de endotoxina cuantitativa Thermo Scientific Pierce es un ensayo de punto final de alta sensibilidad que mide y detecta con precisión la endotoxina en una muestra de proteína, péptido, ácido nucleico (ADN o ARN), vacuna o anticuerpo mediante el ensayo de lisado de amebocitos. El lisado de amebocitos de Limulus (LAL) se utiliza ampliamente como un ensayo simple y sensible para la detección de endotoxinas.
Las características y beneficios del kit cuantitativo de endotoxinas cromogénicas de Pierce incluyen:
• Altamente sensible con un amplio rango: detecta tan sólo 0.
01 UE/mL a 1 UE/mL
• Específico: sin interferencias de ß-glucanos y adecuado para una amplia gama de muestras, incluidos plasma, proteínas, vacunas, plásmidos o ácidos nucleicos (ADN y ARN).
• Rápido: realice el ensayo en tan solo 20 minutos. El kit cuantitativo de endotoxinas cromogénicas Thermo Scientific Pierce es un ensayo de punto final de alta sensibilidad que utiliza lisados ​​de amebocitos de Limulus (LAL) derivados de la sangre del cangrejo herradura (Limulus polyphemus) para medir y detectar con precisión las endotoxinas. Las endotoxinas se pueden encontrar en muestras de plasma, proteínas, péptidos, ácidos nucleicos o anticuerpos. Estos kits cuantitativos de endotoxinas cromogénicas permiten la detección dentro de un amplio rango de sensibilidad de 0.
01 a 1.
0 EU/mL* con un espectrofotómetro estándar o un lector de placas a 405–410 nm. Nuestros kits flexibles permiten analizar muestras en un rango bajo de 0.
01–0.
1 EU/mL o en un rango alto de 0.
1–1.
0 EU/mL, dependiendo de sus necesidades de investigación.
El kit Pierce Chromogenic Endotoxin Quant utiliza el método de lisado de amebocitos, que mide la interacción de la endotoxina con la proenzima factor C presente en los amebocitos circulantes del cangrejo herradura. La actividad proteolítica de esta proenzima se activa en presencia de LPS. Los niveles de endotoxina se determinan midiendo la actividad del factor C en presencia del sustrato peptídico sintético cromogénico incoloro (Ac-Ile-Glu-Ala-Arg-pNA), que libera p-nitroanilina (pNA) tras la proteólisis, lo que produce un color amarillo que puede medirse a una absorbancia de 405 nm. La intensidad del color desarrollado es directamente proporcional a la cantidad de endotoxina presente en la muestra y se calcula utilizando una curva estándar de una cantidad conocida de endotoxina. Este ensayo se ha convertido en el estándar de la industria para la detección de endotoxinas en productos farmacéuticos, dispositivos médicos, análisis de alimentos y agua, así como en la investigación médica y de ciencias de la vida.
Asociación de endotoxinas y enfermedades Las endotoxinas se liberan en su entorno cuando las bacterias gramnegativas experimentan una división celular normal o en grandes concentraciones cuando están dañadas o sufren lisis celular. Dado que las endotoxinas son pirogénicas (inducen fiebre) en los mamíferos, identificar y monitorear los niveles de endotoxinas es extremadamente importante en muchos campos, incluido el estudio del microbioma para evaluar la respuesta inmunitaria periférica de una enfermedad específica. Las endotoxinas se han asociado con la enfermedad del hígado graso no alcohólico (EHGNA), la enfermedad meningocócica y varios tipos de sepsis. Las endotoxinas pueden ser problemáticas en pacientes con quemaduras debido a la translocación de bacterias endógenas y la pérdida de líquidos, lo que resulta en enfermedades relacionadas con el tracto gastrointestinal, como isquemia intestinal o daño intestinal. La gravedad de los síntomas de enfermedades como la enfermedad de Crohn, la colitis ulcerosa y la fibrosis quística también se ha relacionado con la cantidad de LPS en el intestino.
Especificidad de los kits de cuantificación de endotoxinas cromogénicas de PierceCuando se miden con el kit de cuantificación de endotoxinas cromogénicas de Pierce, los niveles de endotoxina en las muestras se determinan con precisión utilizando el estándar de endotoxina incluido de concentración conocida que se deriva de E.
coli cepa O111: B4. El bajo rango de sensibilidad de este ensayo permite una mayor dilución de muestras con cantidades limitadas o que contienen sustancias interferentes, lo que ayuda a evitar posibles falsos negativos o falsos positivos en la cuantificación de endotoxinas. Este ensayo también es compatible con el (1,3)-β-D-glucano, un componente de la pared celular de bacterias y hongos. Los β-glucanos no son pirogénicos, pero pueden activar el factor G y desencadenar la cascada de coagulación, lo que produce falsos positivos en el ensayo de lisado de amebocitos. No se requieren bloqueadores de β-glucanos para este ensayo, y en muestras que contienen ≤10 ng/mL de (1,3)-β-D-glucano, no se observa mejora. Consulte la Tabla 1 en las figuras de datos para obtener más información sobre los reactivos analizados y sus interacciones.
Importancia de las pruebas de endotoxinas. Aunque las endotoxinas no son organismos infecciosos, son tóxicas y pueden provocar shock endotóxico, inflamación o sepsis en animales y cultivos de tejidos. Dado que estos compuestos son termoestables y resistentes a los procedimientos de esterilización, la identificación de la contaminación por endotoxinas es fundamental. Las pruebas sensibles de endotoxinas también son esenciales en la investigación médica y de ciencias de la vida debido a los bajos niveles de endotoxinas requeridos para los cultivos celulares y la investigación animal in vivo.
La eliminación y el análisis de endotoxinas también son necesarios en muestras producidas a partir de bacterias gramnegativas antes de la transfección celular o la inyección en animales. La determinación de los niveles de endotoxinas es importante para evaluar la eficacia de los métodos de eliminación de endotoxinas y prevenir el choque endotóxico, la inflamación o la sepsis en células de cultivo tisular y animales inyectados con proteínas contaminadas con endotoxinas. *Una unidad de endotoxina/ml (UE/ml) equivale aproximadamente a 0.
1 ng de endotoxina/mL de solución.
Productos relacionados: Resina de alta capacidad para la eliminación de endotoxinas Pierce™. Columnas de centrifugación de alta capacidad para la eliminación de endotoxinas Pierce™. Ensayo: Ensayo cromogénico de punto final.
Rango de ensayo: 0.
01 a 0.
1 UE/mL, 0.
1 a 1.
0 UE/mL
Sensibilidad del ensayo: 0.
01 UE/mL
Método de detección: colorimétrico
Formato: Kit
Cantidad: 240 reacciones
Condición de envío: Hielo húmedo
Suficiente para: 240 ensayos de pocillos de microplaca que contienen 0.
01 a 1 unidades de endotoxina/mL
Objetivo: Endotoxinas
Línea de productos: Pierce™
Tipo: Kit de cuantificación de endotoxinas
Tamaño de la unidad: cada una