Thermo Fisher, A44390, Kit de biotinilación y aislamiento de superficies celulares Pierce™

Kit de biotinilación y aislamiento de superficies celulares Pierce™ El kit de biotinilación y aislamiento de proteínas de superficie celular Thermo Scientific Pierce permite la biotinilación, solubilización y enriquecimiento selectivos de proteínas de la membrana plasmática.
Las características del kit de biotinilación y aislamiento de proteínas de superficie celular incluyen:
•Rendimiento mejorado: el kit y el protocolo se han rediseñado para mejorar el enriquecimiento y la extracción de proteínas de membrana plasmática biotiniladas, al tiempo que se minimiza la contaminación de proteínas intracelulares.
•Optimizado: se actualizó el protocolo para reducir el tiempo de procesamiento y la cantidad de pasos, y se optimizaron las formulaciones de reactivos para mejorar el rendimiento.
•Compatible: los reactivos se han verificado con líneas celulares en suspensión y adherentes, con instrucciones adicionales proporcionadas para la preparación de muestras de MS
Aplicaciones validadas: reactivos y procedimientos compatibles con Western Blot y MS. Este kit fácil de usar proporciona todos los componentes y procedimientos necesarios para un marcaje óptimo y el posterior aislamiento de las proteínas de la superficie celular. Los tampones se suministran preformulados para obtener resultados consistentes. Las células de mamíferos se marcan primero con EZ-Link Sulfo-NHS-SS-Biotin, un reactivo de biotinilación amino-escindible por tiol. Posteriormente, las células se lisan y las proteínas marcadas se capturan con NeutrAvidin Agarosa. El ditiotreitol (DTT) se utiliza en la elución para reducir los enlaces disulfuro en la biotina, lo que libera las proteínas unidas sin la biotina. Este kit contiene reactivos suficientes para ocho experimentos, que consisten en dos placas de 15 cm con una confluencia del 85-95% o cuatro matraces de 75 cm².
Las proteínas de la superficie celular representan un subconjunto clave de las proteínas celulares y desempeñan un papel fundamental en la transducción de señales, la adhesión celular y el transporte iónico. Estas proteínas son difíciles de extraer y aislar eficientemente debido a sus múltiples dominios transmembrana. A menudo, los detergentes agresivos y las condiciones necesarias para una extracción eficiente provocan la desnaturalización y contaminación de las proteínas de la membrana plasmática tras el aislamiento. Como alternativa, este kit utiliza una sulfo-NHS-SS-biotina impermeable a la membrana y reactiva a aminas para marcar eficientemente las proteínas de la superficie celular con lisinas accesibles. Las condiciones de lisis, captura, lavado y elución se han optimizado para un enriquecimiento y aislamiento eficientes, minimizando al mismo tiempo la contaminación de las proteínas intracelulares.
El protocolo se ha optimizado para su uso con diversas líneas celulares de mamíferos, incluyendo células adherentes y en suspensión, y resulta útil para el análisis de la expresión diferencial entre células tratadas y no tratadas, o entre una o más líneas celulares. La selectividad y la eficiencia del aislamiento de las proteínas de superficie celular se han verificado mediante Western blot y análisis LC-MS.
Línea de productos: Pierce™
Cantidad: 8 muestras
Condición de envío: Temperatura ambiente
Tipo de producto: Kit de aislamiento
Tamaño de la unidad: cada una