Thermo Fisher, A55862, Ensayo de proteína BCA Pierce™ Dilution-Free™ Rapid Gold

El kit de análisis de proteínas Pierce Rapid Gold BCA sin dilución de 20 ml es un análisis sencillo, rápido y preciso, optimizado para determinar la concentración total de proteínas. Es compatible con detergentes y tiene un rango dinámico 5 veces más amplio que los análisis de proteínas tradicionales de 0.
0,2–10 mg/mL. Este amplio rango dinámico elimina la necesidad de diluir la mayoría de las muestras para que se ajusten al rango del ensayo.
Además, el Ensayo Rápido de Proteínas BCA con Oro sin Dilución incluye un conjunto de siete estándares de proteína BSA prediluidos, envasados ​​en una tira de tubos multicanal compatible con pipetas, por lo que no se requieren diluciones seriadas. La tira de tubos incluye un tubo vacío que permite al usuario añadir su propio tampón de muestra para la sustracción del blanco. El Soporte para Tiras de Tubos sin Dilución (N.° de Cat. A57184) facilita su manejo en la mesa de trabajo.
Características del kit de ensayo rápido de proteínas BCA con oro sin dilución: Sin dilución: elimina la necesidad de diluciones de muestra y curva estándar, lo que reduce el tiempo de configuración hasta en un 80 %. Tiempo de ensayo corto: reacción de cinco minutos a temperatura ambiente. Amplio rango de ensayo: rango de trabajo lineal para BSA de 20 a 10 000 μg/ml. Uniforme: presenta una variación proteína-proteína similar a la del ensayo de proteínas BCA tradicional y una menor variación proteína-proteína que los métodos de ensayo de proteínas de unión a colorante (Bradford). Compatible: no se ve afectado por las concentraciones típicas de la mayoría de los detergentes iónicos y no iónicos. Colorimétrico: absorbancia óptima a 480 nm. Preciso: dos veces más preciso que los ensayos Bradford. El kit de ensayo rápido de proteínas BCA con oro sin dilución Pierce utiliza la misma tecnología de quelación de cobre que el conocido ensayo de proteínas BCA Pierce tradicional y proporciona una precisión comparable, pero con una incubación de cinco minutos a temperatura ambiente. y medido a 480 nm. Esta mejora elimina la necesidad de realizar diluciones seriadas o de muestras, soportar largos periodos de incubación o exponer las muestras a temperaturas elevadas, lo que permite obtener resultados más rápidamente.
El ensayo tradicional de proteínas BCA es un ensayo de proteínas ampliamente utilizado y aceptado, confiable por su alta precisión en la determinación de la concentración de proteínas y su compatibilidad con la mayoría de los tipos de muestras utilizados en la investigación de proteínas. Sin embargo, para desarrollar las muestras con este protocolo tradicional, se debe calentar la reacción a 37 °C durante 30 minutos o dejar que se desarrolle a temperatura ambiente durante dos horas. El ensayo rápido de proteínas BCA Gold sin dilución mantiene las características clave del ensayo tradicional de BCA, pero permite una incubación rápida a temperatura ambiente, equivalente a la de los métodos de unión de colorantes.
El ensayo rápido de oro BCA sin dilución permite evaluar el rendimiento en lisados ​​de células completas y fracciones de columna de afinidad, así como para monitorizar la contaminación proteica en aplicaciones industriales. Al igual que el ensayo tradicional de BCA, el ensayo rápido de oro BCA sin dilución se ve mucho menos afectado por las diferencias en la composición proteica que los métodos de unión de colorantes, lo que proporciona una baja variación entre proteínas.
Cómo el Ensayo Rápido de Proteínas BCA Gold sin Dilución detecta proteínas. El Ensayo Rápido de Proteínas BCA Gold sin Dilución utiliza el mismo método de reducción de cobre que el Ensayo BCA tradicional, con un quelante de cobre único. El ensayo combina la conocida reducción de Cu₂ a Cu₁ por la proteína en un medio alcalino con la detección colorimétrica altamente sensible y selectiva del catión cuproso (Cu₁) mediante el quelante patentado. El primer paso es la quelación del cobre con la proteína en un entorno alcalino para formar un complejo verde claro. En esta reacción, conocida como reacción de biuret, los péptidos que contienen tres o más residuos de aminoácidos forman un complejo quelado coloreado con iones cúpricos en un entorno alcalino que contiene tartrato de sodio y potasio.
En el segundo paso de la reacción de desarrollo de color, el quelante BCA Oro Rápido sin Dilución reacciona con el catión reducido (cuproso) formado en el primer paso. El producto de reacción, de color dorado intenso, resulta de la quelación de dos moléculas de BCA con un ion cuproso. El complejo BCA/cobre es soluble en agua y presenta una fuerte absorbancia lineal a 480 nm al aumentar la concentración de proteína. El complejo es aproximadamente 100 veces más sensible (límite inferior de detección) que el color verde pálido de la primera reacción.
La reacción que conduce a la formación del color está fuertemente influenciada por cuatro residuos de aminoácidos (cisteína, cistina, tirosina y triptófano) en la secuencia de aminoácidos de la proteína. Sin embargo, a diferencia de los métodos de unión del colorante Coomassie (i.
e. Bradford), la estructura peptídica universal también contribuye a la formación del color, lo que ayuda a minimizar la variabilidad causada por las diferencias en la composición de las proteínas.
Compatibilidad del ensayo de proteínas BCA con oro rápido sin dilución. Ciertas sustancias interfieren con el ensayo de proteínas BCA con oro rápido sin dilución, incluyendo aquellas con potencial reductor, agentes quelantes y ácidos o bases fuertes. Dado que interfieren con la estimación de proteínas incluso en concentraciones mínimas, evite las siguientes sustancias como componentes del tampón de muestra: Ácido ascórbico, EGT, Hierro, Sacarosa impura, Catecolaminas, Glicerol impuro, Lípidos, Triptófano, Creatinina, Peróxido de hidrógeno, Melibiosa, Tirosina, Cisteína, Hidrazidas, Rojo fenol, Ácido úrico, TCEP, Timerosal, 2-mercaptoetanol. Soporte para tiras de tubos Pierce sin dilución. El soporte para tiras de tubos Pierce sin dilución es un soporte de espuma reutilizable para usar con los estándares de proteína BSA sin dilución Pierce y se incluye con la muestra de 20 ml del kit de ensayo de proteínas BCA con oro rápido sin dilución Pierce. También se vende por separado. Las concentraciones del estándar de proteína están impresas en el soporte para tiras de tubos para facilitar su consulta y pipeteo en la mesa de trabajo.
Rango de ensayo: 20 a 10 000 μg/mL
Para usar con (aplicación): detección basada en solución, absorbancia
Para usar con (equipo): espectrofotómetro, lector de microplacas
Línea de productos: Pierce™ Dilution-Free™
Tipo de producto: Ensayo de cuantificación de proteínas
Cantidad: 20 mL
Condición de envío: Hielo húmedo
Especificidad: No específica del objetivo
Método de detección: colorimétrico
Tamaño de la unidad: cada una