Thermo Fisher, AM1344, kit de transcripción mMESSAGE mMACHINE™ T7 Invitrogen™

Kit de transcripción mMESSAGE mMACHINE™ T7 de Invitrogen™. Los kits mMESSAGE mMACHINE™ están diseñados para la síntesis in vitro de grandes cantidades de ARN con capuchón. El ARN con capuchón imita a la mayoría de los ARNm eucariotas encontrados in vivo, gracias a su estructura de capuchón de 7-metil guanosina en el extremo 5'. Las reacciones del kit mMESSAGE mMACHINE™ incluyen el análogo de capuchón [m7G(5')ppp(5')G] en una reacción de transcripción de alto rendimiento. El análogo de capuchón se incorpora únicamente como la primera G o la G terminal 5' del transcrito, ya que su estructura impide su incorporación en cualquier otra posición de la molécula de ARN. Cómo funcionan los kits mMESSAGE mMACHINE™: Los kits mMESSAGE mMACHINE™ tienen un formato de reacción simplificado en el que los cuatro ribonucleótidos y el análogo de capuchón se mezclan en una sola solución. La relación análogo de capuchón:GTP de esta solución es de 4:1, óptima para maximizar tanto el rendimiento de ARN como la proporción de transcripciones con capuchón. Los kits mMESSAGE mMACHINE™ son ideales para la síntesis rutinaria de ARN con capuchón para microinyección de ovocitos, traducción in vitro, transfección y otras aplicaciones. Los altos rendimientos se logran optimizando las condiciones de reacción para la síntesis de ARN en presencia de altas concentraciones de nucleótidos. Además, el ARN sintetizado está protegido de la degradación por cualquier ribonucleasa contaminante que pueda estar presente con el inhibidor de ARNasa, un componente de la mezcla enzimática. Con los kits mMESSAGE mMACHINE™, en una reacción de 20 μL durante una incubación de 2 horas, la transcripción de ARN con capuchón de alto rendimiento mMESSAGE mMACHINE™ producirá grandes cantidades de ARN con capuchón. Hasta 10–50 veces el rendimiento obtenido con las reacciones de transcripción in vitro convencionales. La proporción de análogo de capuchón y GTP se ha optimizado para lograr el mejor equilibrio entre el rendimiento (15-35 μg) y la proporción de transcritos con capuchón (80%). Los kits mMESSAGE mMACHINE™ también contienen una solución de precipitación de LiCl eficaz para separar proteínas y nucleótidos no incorporados (incluido el análogo de capuchón libre) del ARN con capuchón, lo que permite una mayor eficiencia de la traducción. Los kits mMESSAGE mMACHINE™ están optimizados únicamente para su uso con las polimerasas incluidas en el kit. El uso de una polimerasa diferente puede resultar en rendimientos bajos. Los kits mMESSAGE mMACHINE™ contienen todos los tampones y reactivos necesarios para 25 reacciones de transcripción. Utilizando la plantilla de control suministrada con los kits (factor de elongación 1α de Xenopus, pTRI Xef), cada reacción mMESSAGE mMACHINE™ producirá aproximadamente 20-30 μg de ARN con la ARN polimerasa T3 o T7, o aproximadamente 15-25 μg de ARN con la ARN polimerasa SP6. Para uso con (aplicación): Transcripción in vitro, ARNm sintético, ARNm, transfección, LNP, GENEart, plásmido de ADN linealizado, administración, productos de PCR.
Número de reacciones: 25 reacciones
Línea de productos: Ambion™, mMESSAGE mMACHINE™
Tipo de producto: Kit de transcripción in vitro T7
Promotor: T7
Cantidad: 25 Reacciones
Condición de envío: Hielo seco
Material de partida: Productos de PCR, plásmido de ADN linealizado
Rendimiento: 20-30 μg
Tipo de producto final: ARNm sintético, ARNm
Formato: Kit
Tipo de muestra: ARNm, ARNm sintético
Tamaño de la unidad: cada una