Thermo Fisher, AM2238, TURBO™ DNasa (2 U/μL) Invitrogen™

TURBO™ DNasa (2 U/μL) La TURBO DNasa de Invitrogen™ escinde el ADN bicatenario de forma inespecífica para dejar oligodesoxinucleótidos fosforilados en el extremo 5'. Presenta mayor afinidad de unión al ADN y permanece activa en presencia de sal.
Nota: Este producto contiene solo la enzima. Si desea esta enzima y reactivos para inactivarla y eliminar cationes divalentes después de la digestión, consulte el kit TURBO DNA-free™.
Las características de TURBO DNase incluyen:
• Hasta 50 veces más actividad y 350 % más de eficiencia catalítica
• Degrada eficientemente el ADN en soluciones que contienen hasta 0.
25 M de sal
• Digiere eficientemente el ADN en oligonucleótidos.
• Muy superior en la limpieza de plantillas de ADN de reacciones de transcripción in vitro
• Libre de ARNasa y de origen recombinante. Utilizando TURBO DNasa, la DNasa I se utiliza comúnmente para eliminar la contaminación de ADN en muestras de ARN antes de la RT-PCR. La DNasa I convencional tiene poca afinidad por el ADN y escinde ADN de baja concentración de forma muy ineficiente. Además, la DNasa I es muy sensible a la sal; tan solo 20 mM de NaCl pueden reducir la actividad de la enzima en un 30 %. Finalmente, la DNasa I se purifica a partir de páncreas bovino, una de las fuentes naturales más ricas de DNasa A. El riesgo de contaminación de la actividad de la RNasa en preparaciones de DNasa I requiere una purificación exhaustiva de la enzima. A pesar de estas limitaciones, la DNasa I que utilizan los investigadores hoy en día es la misma enzima que Kunitz caracterizó por primera vez hace más de medio siglo.
Una DNasa diferente con propiedades superiores a la DNasa silvestre, la DNasa ITURBO, se desarrolló mediante ingeniería de proteínas que introdujo cambios de aminoácidos en el sitio de unión al ADN de la DNasa I silvestre. Estos cambios aumentan notablemente la afinidad de la proteína por el ADN. El resultado es una enzima versátil con una Km para el ADN seis veces menor y la capacidad de mantener al menos el 50 % de su actividad máxima en soluciones con una concentración cercana a 200 mM de sal monovalente, incluso con una concentración de ADN en el rango nanomolar (nM). Cuando las reacciones de transcripción in vitro se tratan con DNasa I o DNasa TURBO, esta última elimina 63 veces más ADN plasmídico molde que la enzima silvestre. La capacidad de DNasa TURBO para unirse a concentraciones muy bajas de ADN significa que la enzima es particularmente eficaz para eliminar trazas de contaminación por ADN. Esto es importante para la eliminación completa del ADN de una muestra, ya que el sustrato de ADN escindible se reduce a medida que avanza la reacción de la DNasa. Por lo tanto, la TURBO DNasa presenta una ventaja funcional sobre la DNasa de tipo silvestre debido a su mayor afinidad por el ADN. Esto se aprovecha al máximo en aplicaciones de RT-PCR, donde incluso unas pocas copias de ADN pueden dar lugar a un falso positivo en la PCR.
Tampón compatible: Tampón de reacción 10X
Tipo de producto: DNasa
Cantidad: 1000 U
Condición de envío: Hielo seco
Concentración: 2 U/μL
Enzima: DNasa
Línea de productos: Ambion™, TURBO™
Tamaño de la unidad: cada una