Thermo Fisher, C10420, Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 488 Kit de ensayo de citometría de flujo

El kit de ensayo de citometría de flujo Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 488 ofrece un ensayo simplificado y más robusto para analizar la replicación del ADN en células proliferantes, en comparación con los métodos tradicionales de BrdU. El ADN recién sintetizado se analiza mediante el láser de 488 nm del citómetro de flujo.
•Precisos: Resultados superiores en comparación con los ensayos de BrdU
•Rápido: Resultados en tan solo 90 minutos
•Económico: más ensayos por kit. Vea la guía de selección para todos los ensayos Click-iT™ EdU y Click-iT™ Plus EdU para citometría de flujo.
Un método avanzado que ofrece resultados superiores al BrdU. El método más preciso para el análisis de la proliferación es la medición directa de la síntesis de ADN. Originalmente, esto se realizaba mediante la incorporación de nucleósidos radiactivos.
e., 3H-timidina. Este método fue reemplazado por la detección basada en anticuerpos del análogo de nucleósido bromodesoxiuridina (BrdU). Los kits de ensayo de citometría de flujo Click-iT™ EdU son alternativas novedosas al ensayo de BrdU. EdU (5-etinil-2'-desoxiuridina) es un análogo de timidina que se incorpora al ADN durante la síntesis activa de ADN. La detección se basa en la química clic: una reacción covalente catalizada por cobre entre una azida y un alquino. En esta aplicación, el alquino se encuentra en la fracción etinilo de EdU, mientras que la azida se acopla a los colorantes Alexa Fluor™ 488, Alexa Fluor™ 647 o Pacific Blue™. Se utilizan métodos estándar de citometría de flujo para determinar el porcentaje de células en fase S en la población (Fig. 1).
Las condiciones suaves permiten su uso con colorantes y anticuerpos del ciclo celular. Las ventajas del marcaje Click-iT™ EdU son evidentes durante el ensayo (Fig. 2). El pequeño tamaño de la azida del colorante permite una detección eficiente del EdU incorporado en condiciones suaves, mientras que la fijación estándar con aldehído y la permeabilización con detergente son suficientes para que el reactivo de detección Click-iT™ acceda al ADN. Esto contrasta con los ensayos de BrdU, que requieren la desnaturalización del ADN (mediante HCl, calor o digestión con DNasa) para exponer el BrdU y poder detectarlo con un anticuerpo anti-BrdU. El procesamiento de muestras para el ensayo de BrdU puede alterar la señal de la distribución del ciclo celular, así como la destrucción de los sitios de reconocimiento de antígenos cuando se utiliza el método de HCl. Por el contrario, el kit de proliferación celular EdU, fácil de usar, es compatible con colorantes del ciclo celular. Este kit de ensayo EdU también puede multiplexarse ​​con anticuerpos contra marcadores de superficie e intracelulares.
Protocolo rápido y sencillo. El protocolo Click-iT™ EdU se basa en los pasos de fijación con aldehído y permeabilización con detergente para el marcaje inmunohistoquímico de anticuerpos, pero EdU es compatible con otros agentes de fijación/permeabilización, como la saponina y el metanol. En solo cinco pasos, estará listo para analizar sus datos de proliferación celular:
• Tratar las células con EdUM
• Fijar y permeabilizar las células
• Detecta células en fase S con el cóctel de detección Click-iT™ durante 30 minutos
• Lavar una vez
• AnaliceObtenga resultados precisos de forma económicaAl aumentar la cantidad de ensayos por kit, el kit de ensayo de citometría de flujo Click-IT™ EdU Alexa Fluor™ 488 es menos costoso que los ensayos BrdU tradicionales, lo que los hace ideales para experimentos grandes.
Solo para uso en investigación. No está destinado a uso terapéutico ni diagnóstico en humanos ni animales.
Método de detección: fluorescencia
Tipo de tinte: Alexa Fluor™ 488
Formato: Tubo(s)
Características ecológicas: menos peligroso
Cantidad: 100 ensayos
Condición de envío: Temperatura ambiente
Emisión: 488
Para usar con (equipo): citómetro de flujo
Línea de productos: Alexa Fluor, Click-iT
Tipo de producto: Kit de ensayo de citometría de flujo
Tamaño de la unidad: cada una