Thermo Fisher, C10424, Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 647 Kit de ensayo de citometría de flujo

El kit de ensayo de citometría de flujo Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 647 ofrece un ensayo simplificado y más robusto para analizar la replicación del ADN en células proliferantes, en comparación con los métodos tradicionales de BrdU. El ADN recién sintetizado se analiza utilizando el láser de 633/5 nm del citómetro de flujo.
•Precisos: Resultados superiores en comparación con los ensayos de BrdU
•Rápido: Resultados en tan solo 90 minutos
Económico: Más ensayos por kit. Consulte la guía de selección de todos los ensayos Click-iT™ EdU y Click-iT™ Plus EdU para citometría de flujo. Un método avanzado que le ofrece resultados superiores a los de BrdU. El método más preciso para el análisis de la proliferación es la medición directa de la síntesis de ADN. Originalmente, esto se realizaba mediante la incorporación de nucleósidos radiactivos, como la 3H-timidina. Este método fue reemplazado por la detección mediante anticuerpos del análogo de nucleósido bromodesoxiuridina (BrdU). Los kits de ensayo de citometría de flujo Click-iT™ EdU son alternativas novedosas al ensayo de BrdU. EdU (5-etinil-2'-desoxiuridina) es un análogo de timidina que se incorpora al ADN durante la síntesis activa de ADN. La detección se basa en la química clic: una reacción covalente catalizada por cobre entre una azida y un alquino. En esta aplicación, el alquino se encuentra en la fracción etinilo de EdU, mientras que la azida se acopla a los colorantes Alexa Fluor™ 488, Alexa Fluor™ 647 o Pacific BlueTM. Se utilizan métodos estándar de citometría de flujo para determinar el porcentaje de células en fase S en la población (Fig. 1). Las condiciones suaves permiten el uso con colorantes del ciclo celular y anticuerpos. Las ventajas del marcaje de EdU Click-iT™ son fácilmente evidentes al realizar el ensayo (Fig. 2). El pequeño tamaño de la azida del colorante permite una detección eficiente del EdU incorporado utilizando condiciones suaves, mientras que la fijación estándar basada en aldehído y la permeabilización con detergente son suficientes para que el reactivo de detección Click-iT™ acceda al ADN. Esto contrasta con los ensayos de BrdU que requieren la desnaturalización del ADN (utilizando HCl, calor o digestión con DNasa) para exponer el BrdU de modo que pueda detectarse con un anticuerpo anti-BrdU. El procesamiento de muestras para el ensayo BrdU puede alterar la señal de la distribución del ciclo celular, así como la destrucción de los sitios de reconocimiento de antígenos, al utilizar el método HCl. Por el contrario, el kit de proliferación celular EdU, fácil de usar, es compatible con los colorantes del ciclo celular. Este kit de ensayo EdU también puede multiplexarse ​​con anticuerpos contra marcadores de superficie e intracelulares. Protocolo rápido y sencillo. El protocolo Click-iT™ EdU se basa en los pasos de fijación con aldehído y permeabilización con detergente para el marcaje inmunohistoquímico de anticuerpos, pero EdU es compatible con otros agentes de fijación/permeabilización, como la saponina y el metanol. En solo cinco pasos, estará listo para analizar sus datos de proliferación celular:
• Tratar las células con EdUM
• Fijar y permeabilizar las células
• Detecta células en fase S con el cóctel de detección Click-iT™ durante 30 minutos
• Lavar una vez
• Analice y obtenga resultados precisos de forma económica. Al aumentar el número de ensayos por kit, el kit de ensayo de citometría de flujo Click-IT™ EdU Alexa Fluor™ 647 es más económico que los ensayos tradicionales de BrdU, lo que lo hace ideal para experimentos a gran escala. Solo para uso en investigación. No está destinado a fines terapéuticos ni diagnósticos en humanos ni animales. Método de detección: Fluorescencia.
Tipo de tinte: Alexa Fluor™ 647
Formato: Tubo(s)
Características ecológicas: menos peligroso
Cantidad: 50 ensayos
Condición de envío: Temperatura ambiente
Emisión: 650/670
Para usar con (equipo): citómetro de flujo
Línea de productos: Click-iT
Tipo de producto: Kit de ensayo de citometría de flujo
Tamaño de la unidad: cada una