Thermo Fisher, C10456, Click-iT™ Plus OPP Alexa Fluor™ 488 Kit de ensayo de síntesis de proteínas

Kit de ensayo de síntesis de proteínas Click-iT™ Plus OPP Alexa Fluor™ 488. El kit de ensayo de síntesis de proteínas Click-iT™ Plus OPP Alexa Fluor™ 488 proporciona un método rápido, sensible y no radiactivo para la detección de la síntesis de proteínas mediante microscopía de fluorescencia o imágenes de alto contenido. En este ensayo, la O-propargil-puromicina (OPP) se incorpora eficazmente a las proteínas recién traducidas en medios completos con metionina y se marca con fluorescencia con un colorante Alexa Fluor™ brillante y fotoestable, en una reacción de clic rápida, altamente específica y suave.
Las características del kit incluyen:
• No requiere cambio de medio: funciona en medios completos que contienen metionina, sin necesidad de eliminar el medio celular
• Habilitado para multiplexación: la tecnología Click-iT™ Plus retiene la señal de GFP y la unión de faloidinas conjugadas con fluorescencia.
• No radiactivo: una alternativa a los métodos tradicionales con 35S-metionina
• Funciona in vivo: los resultados publicados demuestran su uso in vivo para la determinación de la traducción de proteínas. El kit contiene O-propargil-puromicina (OPP), un alquino análogo de la puromicina (también disponible por separado), así como picolil azida Alexa Fluor™ 488 y todos los reactivos necesarios para realizar la reacción de clic. La OPP se administra a células cultivadas y se incorpora a las proteínas durante la síntesis proteica activa. La adición de la picolil azida Alexa Fluor™ 488 y los reactivos de la reacción de clic produce una ligadura quimioselectiva, o reacción de clic, entre el colorante picolil azida y el alquino OPP, lo que permite detectar las proteínas modificadas mediante análisis por imagen.
La reacción de clic utiliza fracciones bioortogonales (biológicamente únicas) para marcar con fluorescencia las células en proliferación, lo que ayuda a producir bajos fondos y alta sensibilidad de detección. Gracias a las suaves condiciones de reacción, los ensayos Click-iT™ Plus detectan eventos de traducción de proteínas, a la vez que permiten preservar la morfología celular, la unión de la faloidina marcada con fluorescencia y la señal fluorescente de la GFP.
A diferencia de la 35S-metionina, utilizada en los métodos tradicionales, la OPP no es un análogo de aminoácido, por lo que puede agregarse directamente a las células en medios completos o utilizarse para determinar la síntesis de proteínas in vivo.
El kit contiene todos los componentes necesarios para marcar y detectar la OPP incorporada en las proteínas recién traducidas de muestras de células adherentes. Incluye reactivos suficientes para marcar 25 cubreobjetos de 18 mm × 18 mm utilizando 1 ml de tampón de reacción por prueba.
Características ecológicas: menos peligroso
Línea de productos: Click-iT™
Tipo de producto: Kit de ensayo de síntesis de proteínas
Cantidad: 1 kit
Tipo de reactivo: reactivo de etiquetado de proteínas nacientes
Etiqueta o tinte: Alexa Fluor 488
Tamaño de la unidad: cada una