Thermo Fisher, C10635, Click-iT™ Plus EdU Alexa Fluor™ 647 Kit de ensayo de citometría de flujo, 100 reacciones

Kit de ensayo de citometría de flujo Click-iT™ Plus EdU Alexa Fluor™ 647, 100 reacciones. El kit de ensayo de citometría de flujo Click-iT® Plus EdU Alexa Fluor® 647 ofrece un ensayo simplificado y más robusto para analizar la replicación del ADN en células proliferantes, en comparación con los métodos tradicionales de BrdU. El ADN recién sintetizado se analiza utilizando el láser de 647 nm del citómetro de flujo. La fórmula Click-iT® Plus es compatible con fluoróforos estándar, incluyendo fluoróforos R-PE y tándems R-PE, así como con proteínas fluorescentes.
• Multiplexable: compatible con R-PE (y tándems) y proteínas fluorescentes
• Preciso: resultados superiores en comparación con los ensayos de BrdU
• Rápido: resultados en tan solo 60 minutos. Consulte la guía de selección de todos los ensayos Click-iT™ EdU y Click-iT™ Plus EdU para citometría de flujo. Multiplexable. La fórmula Click-iT® Plus proporciona una mayor multiplexibilidad en comparación con los ensayos originales de citometría de flujo Click-iT® EdU. Los ensayos Click-iT® Plus EdU se pueden usar junto con los tándems R-PE y R-PE, así como con proteínas fluorescentes como GFP y mCherry, sin perder la precisión ni la velocidad del ensayo Click-iT® EdU original. Un método avanzado que le brinda resultados superiores a BrdU. El método más preciso de análisis de proliferación es la medición directa de la síntesis de ADN. Originalmente, esto se realizaba mediante la incorporación de nucleósidos radiactivos. Este método fue reemplazado por la detección basada en anticuerpos del análogo de nucleósido bromodesoxiuridina (BrdU). El ensayo de citometría de flujo Click-iT® Plus EdU es una alternativa innovadora al ensayo BrdU. EdU (5-etinil-2'-desoxiuridina) es un análogo de timidina que se incorpora al ADN durante la síntesis activa de ADN. La detección se basa en la química clic, una reacción covalente catalizada por cobre entre una azida y un alquino. En esta aplicación, el alquino se encuentra en la fracción etinilo de EdU, mientras que la azida se acopla al colorante Alexa Fluor®. Se utilizan métodos estándar de citometría de flujo para determinar el porcentaje de células en fase S en la población. Las condiciones suaves permiten su uso con colorantes del ciclo celular y anticuerpos. El pequeño tamaño de la azida del colorante permite una detección eficiente del EdU incorporado en condiciones suaves, mientras que la fijación estándar con aldehído y la permeabilización con detergente son suficientes para que el reactivo de detección Click-iT® Plus acceda al ADN. Esto contrasta con los ensayos de BrdU que requieren la desnaturalización del ADN (mediante HCl, calor o digestión con DNasa) para exponer el BrdU de modo que pueda detectarse con un anticuerpo anti-BrdU. El procesamiento de muestras para el ensayo de BrdU puede provocar una alteración de la señal de la distribución del ciclo celular, así como la destrucción de los sitios de reconocimiento de antígenos cuando se utiliza el método de HCl. Por el contrario, el ensayo Click-iT® Plus EdU, fácil de usar, es compatible con los colorantes del ciclo celular. El ensayo Click-iT® Plus EdU también puede multiplexarse ​​con anticuerpos contra marcadores de superficie e intracelulares, así como conjugados marcados con fluoróforos estándar, incluidos R-PE, tándems de R-PE y proteínas fluorescentes (GFP y mCherry). Protocolo rápido y sencillo El protocolo Click-iT® Plus EdU se basa en los pasos de fijación con aldehído y permeabilización con detergente para el marcaje inmunohistoquímico de anticuerpos. Sin embargo, EdU es compatible con otros agentes de fijación/permeabilización, incluidos la saponina y el metanol. En solo cinco pasos, estará listo para analizar sus datos de proliferación celular: 1. Trate las células con EdU. 2. Fije y permeabilice las células. 3. Detecte las células en fase S con el cóctel de detección Click-iT® Plus durante 30 minutos. 4. Lave una vez. 5. Analice. Los resultados se pueden ver en tan solo 60 minutos en algunas circunstancias, pero recomendamos 90 minutos para todas las aplicaciones. Método de detección: Fluorescencia.
Excitación/Emisión: 650/670
Formato: Tubo(s)
Etiqueta o tinte: Alexa Fluor™ 647
Línea de productos: Click-iT™
Cantidad: 100 ensayos
Condición de envío: Temperatura ambiente
Para usar con (equipo): citómetro de flujo
Tipo de producto: Kit de ensayo
Tamaño de la unidad: cada una