Kit de ensayo de citometría de flujo Thermo Fisher, C10841, CellEvent™ Senescence Green

Thermo Fisher, C10841, Kit de ensayo de citometría de flujo CellEvent™ Senescence Green. El kit de ensayo de citometría de flujo CellEvent Senescence Green permite la detección mediante citometría de flujo de la senescencia celular mediante hidrólisis de β-galactosidasa. El kit contiene un tampón optimizado y un reactivo a base de fluoresceína con dos grupos galactósidos, lo que lo convierte en una diana específica para la β-galactosidasa. La activación de la β-galactosidasa se utiliza comúnmente como biomarcador de células senescentes. Esta enzima hidrolasa reside en los lisosomas y convierte los β-galactósidos en monosacáridos en condiciones de pH ácido. El producto escindido por la enzima se retiene en la célula gracias a la unión covalente de proteínas intracelulares y emite una señal fluorogénica con una absorción/emisión máxima de 490/514 nm.
Las características del kit de ensayo de citometría de flujo CellEvent Senescence Green incluyen:
• Detección fluorescente de la hidrólisis de β-galactosidasa mediante citometría de flujo
• Ensayo de células fijas
• Compatibilidad multicolor. Cuando las células normales alcanzan el final de su limitada vida replicativa, comúnmente conocida como el límite de Hayflick, entran en una fase senescente donde permanecen metabólicamente activas sin sufrir procesos de muerte celular. Estas células senescentes adoptan un estado fenotípico específico que incluye la aparición de células multinucleadas, aumento de la vacuolización, expresión de β-galactosidasa dependiente del pH y cambios morfológicos donde las células se agrandan y se extienden. A través de diversos mecanismos, pueden desempeñar un papel en la supresión tumoral, la progresión tumoral, el envejecimiento y la reparación tisular. La β-galactosidasa reside en los lisosomas y convierte los β-galactósidos en monosacáridos en condiciones de pH ácido. La actividad es óptima a un pH lisosomal de 4, pero los ensayos convencionales miden a pH 6. Se ha demostrado que la actividad normalizada de la β-galactosidasa es dos veces mayor en células senescentes que en células presenescentes, independientemente del valor de pH utilizado para la prueba.
Tradicionalmente, el sustrato colorimétrico de la β-galactosidasa, el 5-bromo-4-cloro-3-indolil-β-D-galactopiranósido (x-gal), se ha utilizado durante mucho tiempo para detectar la actividad metabólica celular in vitro. Tras la hidrólisis por la β-galactosidasa, la x-gal se convierte en un precipitado azul, no apto para ensayos de citometría de flujo. Por lo tanto, hemos desarrollado un sustrato fluorescente sensible para la β-galactosidasa que puede utilizarse en ensayos de citometría de flujo para la detección de células senescentes.
Método de detección: fluorescencia
Cantidad: 200 ensayos
Condición de envío: Temperatura ambiente
Color: Verde
Emisión: 488/514
Para uso con (aplicación): citometría de flujo
Para usar con (equipo): citómetro de flujo
Línea de productos: CellEvent
Tipo de producto: Kit de ensayo de citometría de flujo
Tamaño de la unidad: cada una