Thermo Fisher, C602003, BL21 Star™ (DE3)pLysS One Shot™ E. coli químicamente competente

BL21 Star™ (DE3)pLysS One Shot™ E. coli químicamente competente. Las células de E. coli BL21 Star (DE3)pLysS químicamente competentes están diseñadas para aplicaciones que requieren una alta expresión de proteínas recombinantes no tóxicas a partir de vectores con un número de copias bajo o alto, como pRSET y pET. La cepa BL21 (DE3)E. coli es una de las cepas hospedadoras más populares para producir proteínas recombinantes y está adaptada para aplicaciones de investigación e industriales (p. ej.,
g., primera insulina humana recombinante biofarmacéutica).
BL21(DE3) es un derivado de la cepa E. coli B que no contiene la proteasa Ion y también es deficiente en la proteasa de membrana externa OmpT. La ausencia de dos proteasas clave reduce la degradación de las proteínas heterólogas expresadas en estas cepas. Además, otras características de estas cepas las hacen especialmente adecuadas para la producción de proteínas, como su rápido crecimiento en un medio mínimo, una menor producción de acetato en medios con alto contenido de glucosa y la capacidad de alcanzar una alta densidad celular.
Esta cepa fue diseñada para portar el lisógeno λDE3, que contiene el gen de la ARN polimerasa T7, bajo el control del promotor thelacUV5. El IPTG es necesario para inducir la expresión del sistema en cascada de la ARN polimerasa T7, que a su vez transcribe el gen diana regulado por el promotor T7. El plásmido pLysS CamR, transportado por la cepa BL21 Star (DE3), pLysS, expresa la lisozima T7, un inhibidor de la ARN polimerasa T7 que previene la expresión deficiente en células no inducidas. El origen p15a de pLysS lo hace compatible con plásmidos derivados de pUC o pBR322.
Esta cepa ofrece una mayor estabilidad del ARNm gracias a una mutación en el gen RNasaE (rne131), que reduce los niveles de ARNasas endógenas y la degradación del ARNm, lo que aumenta la estabilidad de los transcritos de ARNm y la producción de proteínas. La cepa BL21 Star (DE3) pLys presenta una menor expresión basal de genes heterólogos que la cepa BL21 Star (DE3). Se recomiendan otras cepas, como BL21-AI, para la expresión de proteínas tóxicas. Las células One Shot BL21 Star (DE3) pLysS químicamente competentes presentan una eficiencia de transformación de >1 x 108 ufc/μg de ADN plasmídico.
One Shot BL21 Star (DE3)pLysS Químicamente CompetenteE.
colioferta:
• Eficiencia de transformación de >1 x 108 ufc/μg de ADN plasmídico
• La deficiencia de proteasa Ion y OmpT reduce la degradación de la proteína recombinante
• El promotor lacUV5 inducible por IPTG controla la expresión de la ARN polimerasa T7
•La mutación rne131 reduce los niveles de ARNasas endógenas y la degradación del ARNm.
• Plásmido pLysS (CamR) para expresión basal reducida en células no inducidas
•La mutación hsdS permite una transformación eficiente del ADN no metilado
Crecimiento rápido en un medio mínimo y capacidad para alcanzar una alta densidad celular. Formato One Shot fácil de usar. Las células BL21 Star (DE3) pLysS químicamente competentes de E. coli se suministran en el práctico formato One Shot de reacción única. Este formato de un solo tubo y un solo uso permite que todos los pasos del protocolo de transformación, hasta la siembra, se realicen en el mismo tubo, lo que ayuda a ahorrar tiempo y a prevenir la contaminación.
GenotipoF-ompThsdSB (rB-, mB-)gal dcm rne131 (DE3) pLysS (CamR)Encuentra la cepa y el formato que necesitasOfrecemos otrascepas de E. coli para la expresión de proteínas.
Para la expresión de proteínas tóxicas, considere BL21-AI One Shot Chemically CompetentE. coli.
BL21 Star (DE3) y otras cepas están disponibles en formatos MultiShot para aplicaciones de alto rendimiento.
Explora los formatos de medios de crecimiento bacteriano.
Ofrecemos una variedad de sistemas para la expresión de proteínas recombinantes en E. coli, el sistema de expresión Champion pET proporciona el mayor nivel de producción de proteínas disponible en cualquier sistema de expresión.
Resistencia bacteriana a los antibióticos: Sí (cloranfenicol)
Proyección azul/blanca: No
Clonación de ADN metilado: No
Contiene episoma F': No
Compatibilidad de alto rendimiento: baja
Mejora la calidad del plásmido: No
Mejora la estabilidad de las proteínas: Sí (lon,ompT)
Mejora la estabilidad del ARN: Sí (rne131, pLysS)
Preparación de ADN no metilado: Sí (dcm)
Línea de productos: One Shot™
Tipo de producto: Células químicamente competentes
Cantidad: 21 x 50 μL/tubo
Reduce la recombinación: No
Condición de envío: Hielo seco
Fago T1 - Resistente (tonA): No
Proteínas tóxicas: No
Nivel de eficiencia de transformación: Eficiencia media (1 x 108 a 1 x 109 ufc/μg)
Formato: Tubo
Promotor: T7
Especie: E. coli (B)
Tamaño de la unidad: cada una