Thermo Fisher, C606003, One Shot™ BL21(DE3)pLysS E. coli químicamente competente

21 tubos de 50 μL One Shot BL21(DE3)pLysS químicamente competentes. Las células de E. coli son ideales para su uso con sistemas de expresión basados ​​en el promotor del bacteriófago T7, como pRSET y pET. El plásmido pLysS, transportado por la cepa BL21(DE3) pLysS, produce lisozima T7, un inhibidor de la ARN polimerasa T7, para reducir la expresión basal del gen de interés. pLysS confiere resistencia al cloranfenicol (CamR) y contiene el origen p15A. Este origen permite que pLysS sea compatible con plásmidos que contienen el origen ColE1 o pMB1 (es decir, pMB1).
Plásmidos derivados de pUC o pBR322. Las proteínas recombinantes no tóxicas para E. coli generalmente se expresan en niveles más altos en las células BL21(DE3) en comparación con la cepa BL21(DE3) pLysS, con un control de expresión más estricto. Se recomienda el uso de BL21(DE3)pLysS cuando se expresan genes tóxicos.
La cepa BL21 (DE3) de E. coli es una de las cepas hospedadoras más populares para producir proteínas recombinantes. Esta cepa fue diseñada para transportar el lisógeno λDE3, que contiene el gen de la ARN polimerasa T7, bajo el control del promotor lacUV5. El IPTG es necesario para inducir la expresión del sistema de cascada de la ARN polimerasa T7, que a su vez transcribe el gen diana regulado por el promotor T7.
BL21(DE3) es un derivado de la cepa E. coli B que no contiene la proteasa iónica y también es deficiente en la proteasa de membrana externa OmpT. La ausencia de dos proteasas clave reduce la degradación de las proteínas heterólogas expresadas en estas cepas. Además, otras características de la cepa las hacen especialmente adecuadas para la producción de proteínas, como su rápido crecimiento en un medio mínimo, una menor producción de acetato en medios con alto contenido de glucosa y la capacidad de alcanzar una alta densidad celular. Las células de E. coli químicamente competentes One Shot BL21(DE3)pLysS pueden alcanzar una eficiencia de transformación >1 x 108 ufc/μg de ADN control.
Las células químicamente competentes One Shot BL21(DE3)pLysS de E. coli ofrecen:
• Eficiencia de transformación de >1 x 108 ufc/μg de ADN plasmídico de control
• Deficiencia de proteasa Ion y OmpT que reduce la degradación de la proteína recombinante
• Promotor lacUV5 inducible por IPTG que controla la expresión de la ARN polimerasa T7
• Plásmido pLysS (CamR) para expresión basal reducida en células no inducidas
•Mutación hsdS que permite la transformación eficiente del ADN no metilado
Crecimiento rápido en un medio mínimo y capacidad para alcanzar una alta densidad celular. Formato One Shot fácil de usar. Las células BL21(DE3)pLysS de E. coli químicamente competentes se suministran en el práctico formato One Shot de reacción única. Este formato de un solo tubo y un solo uso permite que todos los pasos del protocolo de transformación, hasta la siembra, se realicen en el mismo tubo, ahorrando así tiempo y evitando la contaminación.
GenotipoF–ompThsdSB (rB–, mB–)gal dcm(DE3) pLysS(CamR)Encuentra la cepa y el formato que necesitasOfrecemos otrascepas de E. coli para la expresión de proteínas.
Para la expresión de proteínas tóxicas, considere BL21 AI One Shot Chemically CompetentE. coli.
BL21 Star (DE3) y otras cepas están disponibles en formatos MultiShot para aplicaciones de alto rendimiento.
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Ofrecemos una variedad de sistemas para la expresión de proteínas recombinantes en E. coli.
El sistema de expresión Champion pET proporciona el mayor nivel de producción de proteínas disponible en cualquier sistema de expresión.
Resistencia bacteriana a los antibióticos: Sí (cloranfenicol)
Proyección azul/blanca: No
Clonación de ADN metilado: No
Contiene episoma F': No
Compatibilidad de alto rendimiento: baja
Mejora la calidad del plásmido: No
Mejora la estabilidad de las proteínas: Sí (lon,ompT)
Mejora la estabilidad del ARN: Sí (pLysS)
Preparación de ADN no metilado: Sí (dcm)
Línea de productos: One Shot™
Tipo de producto: Células químicamente competentes
Cantidad: 21 tubos de 50 μL
Reduce la recombinación: No
Condición de envío: Hielo seco
Fago T1 - Resistente (tonA): No
Proteínas tóxicas: No
Nivel de eficiencia de transformación: Eficiencia media (1 x 108 a 1 x 109 ufc/μg)
Formato: Tubo
Promotor: T7
Especie: E. coli (B)
Tamaño de la unidad: cada una