Thermo Fisher, C737303, One Shot™ Stbl3™ E. coli químicamente competente

One Shot™ Stbl3™ E. coli químicamente competente One Shot Stbl3™ Las E. coli químicamente competentes están diseñadas para clonar repeticiones directas encontradas en vectores de expresión lentiviral, ya que estas células reducen la frecuencia de recombinación homóloga de las repeticiones directas encontradas en vectores lentivirales (kits de expresión lentiviral ViraPower) y otros vectores retrovirales (plásmidos basados ​​en VIH propensos a la inestabilidad). La cepa Stbl3 ha sido esencial para muchas aplicaciones, incluidos los flujos de trabajo de edición genómica CRISPR, el desarrollo de vacunas (incluida la investigación de la vacuna contra el SARS-CoV-2), la clonación y el mantenimiento de vectores con múltiples repeticiones (p. ej., proteína codificante de genes con secuencia repetida). La eficiencia de transformación de las células químicamente competentes One Shot Stbl3 es >1 x 108 ufc/μg de ADN plasmídico. La cepa Stbl3 se deriva de la cepa HB101E. coli con un genoma híbrido de cepas K-12 y B. Contiene el alelo therecA13 de la mutación therecA, que reduce la recombinación inespecífica en el ADN clonado. Las mutaciones en el sistema de restricción dependiente de la metilación de Stbl3 (mcrB, mrr y hsdS20) permiten la construcción de ADN genómico para clonación. Esta cepa posee endA1+, una endonucleasa I inespecífica que digiere el ADN. La cepa Stbl3 también produce de forma reproducible más ADN plasmídico que las cepas DH (10 veces o más ADN plasmídico que la cepa TOP10) y produce lentivirus de alta titulación de forma sostenida. La cepa E. coli químicamente competente One Shot Stbl3 ofrece:
• Eficiencia esperada de >1 x 108 transformantes/μg de ADN plasmídico
• Rendimiento óptimo para la propagación de vectores lentivirales y mantenimiento de repeticiones directas
• Capacidad mejorada de clonación de ADN genómico (mcrB, mrr, y hsdS20)
• Capacidad para producir altos rendimientos de ADN. Nota: Para un rendimiento óptimo y mantener plásmidos con secuencias repetidas complejas, las células Stbl3 deben cultivarse a 30 °C. Al aislar ADN plasmídico de células Stbl3 con endonucleasa I de tipo silvestre (endA1+), asegúrese de que los tampones contengan 10 mM de EDTA. El EDTA inactivará la endonucleasa y evitará el corte del ADN y la degradación del vector (siga las instrucciones del kit de purificación de ADN plasmídico para las cepas de E. coli endA1+). Formato One Shot fácil de usar. Las células de E. coli Stbl3 químicamente competentes se suministran en el práctico formato One Shot de una sola reacción. Este formato de un solo tubo y un solo uso permite que todos los pasos del protocolo de transformación, hasta la siembra, se realicen en el mismo tubo, lo que ayuda a ahorrar tiempo y a prevenir la contaminación. Genotipo F–mcrBmrr hsdS20(rB–, mB–)recA13supE44ara-14galK2lacY1proA2rpsL20(StrR)xyl-5 λ–leu mtl-1. Encuentre la cepa y el formato que mejor se adapten a sus necesidades. Hay otras cepas Stbl disponibles con diferentes antecedentes genéticos. La cepa Stbl3 está disponible en formato MultiShot para aplicaciones de alto rendimiento. Explore los formatos de medios de crecimiento bacteriano. Resistencia a antibióticos: Bacteriana: (Sí) Estreptomicina.
Proyección azul/blanca: No
Clonación de ADN metilado: Sí (mcrB, mrr)
Clonación de ADN inestable: Sí (recA13)
Contiene episoma F': No
Compatibilidad de alto rendimiento: baja
Mejora la calidad del plásmido: No
Plásmido: Puede utilizarse para plásmidos >20 kb
Preparación de ADN no metilado: No
Línea de productos: One Shot™
Tipo de producto: Células químicamente competentes
Cantidad: 21 x 50 μL/tubo
Reduce la recombinación: Sí (recA13)
Condición de envío: Hielo seco
Fago T1 - Resistente (tonA): No
Nivel de eficiencia de transformación: Eficiencia media (1 x 108 a 1 x 109 ufc/μg)
Formato: Tubo
Especie: E. coli (híbrido K12/B)
Tamaño de la unidad: cada una