Células competentes Thermo Fisher, C739601, MultiShot™ StripWell Stbl3™

Células competentes MultiShot™ StripWell Stbl3™. Las células químicamente competentes MultiShot StripWell Stbl3 de E. coli son células competentes para la clonación, diseñadas para clonar repeticiones directas presentes en vectores de expresión lentivirales. Las células Stbl3 reducen la frecuencia de recombinación homóloga y se prealicuotan en un rack con 12 tiras de 8 pocillos para aumentar la productividad en transformaciones bacterianas de alto rendimiento.
Consiga una estabilidad notable de los vectores lentivirales en células Stbl3Las células competentes MultiShot StripWell Stbl3 reducen la frecuencia de recombinación homóloga de las repeticiones directas que se encuentran en los vectores lentivirales (p. ej.,
g., kits de expresión lentiviral ViraPower) y otros vectores retrovirales (p. ej.
p. ej., plásmidos basados ​​en VIH con propensión a la inestabilidad). La cepa Stbl3 se ha utilizado en numerosas aplicaciones, como la edición genómica mediante flujos de trabajo CRISPR, el desarrollo de vacunas y la clonación y el mantenimiento de vectores con múltiples repeticiones (p. ej., plásmidos basados ​​en VIH con propensión a la inestabilidad).
ej., proteína codificante de genes con secuencia repetida). La eficiencia de transformación de células químicamente competentes de E. coli MultiShot StripWell Stbl3 es >1 x 107 ufc/μg de ADN plasmídico.
La cepa Stbl3E. coli deriva de la cepa HB101 (con un genoma híbrido de las cepas K-12 y B). Si bien la cepa Stbl3 contiene el alelo recA13 de la mutación recA, que reduce la recombinación inespecífica en el ADN clonado, su capacidad para mantener insertos inestables se debe, según se informa, a otras características genéticas. Las mutaciones en el sistema de restricción dependiente de la metilación de Stbl3 (mcrB, mrr y hsdS20) permiten la construcción de ADN genómico para clonación. Esta cepa es endA1+, por lo que las células contienen una endonucleasa I inespecífica que digiere el ADN. Stbl3 produce, de forma reproducible, mucho más ADN plasmídico que las cepas DH (p. ej.,
p. ej., 10 veces o más ADN plasmídico que la cepa TOP10) y produce de manera sostenible lentivirus de alto título.
Las celdas competentes MultiShot StripWell Stbl3 ofrecen:
• Eficiencia esperada de >1 x 107 transformantes/μg de ADN plasmídico
• Rendimiento óptimo para la propagación de vectores lentivirales y mantenimiento de repeticiones directas
• Capacidad mejorada de clonación de ADN genómico (mcrB, mrr, y hsdS20)
• Capacidad para producir altos rendimientos de ADN. Nota: Para un rendimiento óptimo manteniendo plásmidos con secuencias repetidas complejas, las células Stbl3 deben cultivarse a 30 °C. Al aislar el ADN plasmídico de células Stbl3 con la endonucleasa I de tipo silvestre (endA1+), asegúrese de que los tampones contengan 10 mM de EDTA. El EDTA inactivará la endonucleasa y evitará el corte del ADN y la degradación del vector (siga las instrucciones del kit de purificación de ADN plasmídico para las cepas de E. coli endA1+).
Formato flexible MultiShot StripWell. Cada StripWell de ocho tubos conectados está diseñado con las mismas características de un solo tubo y un solo uso que nuestros tubos de formato One Shot. Este formato permite que todos los pasos del protocolo de transformación, hasta la siembra, se realicen en el mismo tubo, ahorrando así tiempo y reduciendo el riesgo de contaminación. Tras la adición de ADN, las células competentes MultiShot StripWell pueden transformarse mediante choque térmico a 42 °C en un baño de agua, todo en el mismo tubo.
Los tubos StripWell se pueden cortar para permitir transformaciones en un solo tubo, eliminando alícuotas desperdiciadas y evitando ciclos de congelación-descongelación que pueden resultar en una menor eficiencia de transformación.
Los beneficios del formato MultiShot StripWell incluyen:
• Mayor productividad: adecuada para experimentación de alto rendimiento.
•Máxima flexibilidad: transforme tan solo 1 tubo o hasta 96 desde el rack StripWell
• Comodidad familiar: agregue ADN directamente a las células, aplique un choque térmico y recupere en el mismo tubo. Genotipo F–mcrBmrr hsdS20(rB–, mB–)recA13supE44ara-14galK2lacY1proA2rpsL20(StrR)xyl-5 λ–leu mtl-1Encuentre la cepa y el formato que necesitaHay otras cepas Stbl disponibles con diferentes antecedentes genéticos.
También hay disponibles muchas otras cepas de E. coli y formatos de células químicamente competentes y electrocompetentes para satisfacer necesidades de transformación específicas.
Para una transformación de alto rendimiento, elija entre nuestra colección de celdas comp formateadas MultiShot o envíenos un correo electrónico para obtener opciones de formato personalizadas.
Ofrecemos medios de crecimiento bacteriano en varios formatos.
Resistencia bacteriana a los antibióticos: Sí (estreptomicina)
Proyección azul/blanca: No
Clonación de ADN metilado: Sí (mcrB, mrr)
Clonación de ADN inestable: Sí (recA13)
Contiene episoma F': No
Compatibilidad de alto rendimiento: Alta
Plásmido: Puede utilizarse para plásmidos >20 kb
Preparación de ADN no metilado: No
Línea de productos: Multishot™
Tipo de producto: Células químicamente competentes
Cantidad: 1 gradilla para 96 ​​tubos (50 μl/tubo)
Reduce la recombinación: Sí (recA13)
Condición de envío: Hielo seco
Fago T1 - Resistente (tonA): No
Formato: Tiras de 8 pocillos
Especie: E. coli (híbrido K12/B)
Tamaño de la unidad: cada una