Thermo Fisher, D2219, BODIPY™ 558/568 NHS Ester (éster de succinimidilo)

El colorante BODIPY™ 558/568 NHS Ester (Éster de succinimidilo) es un colorante fluorescente rojo brillante. Presenta un alto coeficiente de extinción y rendimiento cuántico de fluorescencia, y es relativamente insensible a la polaridad del disolvente y a los cambios de pH. A diferencia de los fluoróforos altamente solubles en agua, el colorante Alexa Fluor™ 488 y la fluoresceína (FITC), los colorantes BODIPY™ poseen propiedades hidrofóbicas únicas, ideales para la tinción de lípidos, membranas y otros compuestos lipofílicos. El colorante BODIPY™ 558/568 tiene una vida media en estado excitado relativamente larga (normalmente 5 nanosegundos o más), lo cual resulta útil para ensayos basados ​​en polarización de fluorescencia, y una amplia sección transversal de dos fotones para la excitación multifotónica. Además de las formulaciones de colorantes reactivos, ofrecemos el colorante BODIPY™ 558/568 conjugado con una variedad de anticuerpos, péptidos, proteínas, trazadores y sustratos de amplificación optimizados para el etiquetado y la detección celular.
El éster NHS (o éster succinimidílico) de BODIPY™ 558/568 es la herramienta más popular para conjugar el colorante con una proteína o anticuerpo. Los ésteres NHS pueden utilizarse para marcar las aminas primarias (R-NH₂) de proteínas, oligonucleótidos modificados con aminas y otras moléculas que contienen aminas. Los conjugados BODIPY™ 558/568 resultantes presentan una fluorescencia brillante, anchos de banda de emisión estrechos y tiempos de vida del estado excitado relativamente largos, lo que puede ser útil para ensayos de polarización de fluorescencia y microscopía de excitación de dos fotones (TPE).
Este colorante reactivo contiene un espaciador de alquilo C3 entre el fluoróforo y el grupo éster NHS. Este espaciador ayuda a separar el fluoróforo de su punto de unión, lo que podría reducir la interacción del fluoróforo con la biomolécula a la que está conjugado.
Información detallada sobre este éster NHS BODIPY™ 558/568:Etiqueta fluorófora:Colorante BODIPY™ 558/568Grupo reactivo:Éster NHS (éster succinimidilo)Reactividad:Aminas primarias en proteínas y ligandos, oligonucleótidos modificados con aminaEx/Em del conjugado:559/568 nmCoeficiente de extinción:97 000 cm-1M-1Peso molecular:443.
23 Reacción de conjugación típica. Los reactivos amino-reactivos pueden conjugarse con prácticamente cualquier proteína o péptido; el protocolo proporcionado está optimizado para anticuerpos IgG. La reacción puede ajustarse para cualquier cantidad de proteína, pero la concentración de proteína debe ser de al menos 2 mg/mL para obtener resultados óptimos. Recomendamos probar tres grados diferentes de marcaje, utilizando tres proporciones molares diferentes de reactivo/proteína.
El éster BODIPY™ NHS normalmente se disuelve en dimetilformamida anhidra (DMF) o dimetilsulfóxido (DMSO) de alta calidad, y la reacción se lleva a cabo a 0.
1-0.
Tampón de bicarbonato de sodio 2 M, pH 8.
3, a temperatura ambiente durante 1 hora. Dado que el pKa de la amina terminal es menor que el del grupo épsilon-amino de la lisina, se puede lograr un marcaje más selectivo del extremo amino utilizando un tampón con un pH más cercano a la neutralidad.
Purificación del conjugado: Los anticuerpos marcados se separan típicamente del colorante BODIPY™ libre mediante una columna de filtración en gel, como Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 o equivalente. Para proteínas de mayor o menor tamaño, seleccione un medio de filtración en gel con un punto de corte de peso molecular adecuado o purifique mediante diálisis. Ofrecemos varios kits de purificación optimizados para diferentes cantidades de conjugado de anticuerpo: Kit de purificación de conjugado de anticuerpo para 0.
5-1 mg (A33086) Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 20-50 μg (A33087) Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 50-100 μg (A33088) Más información sobre el marcaje de proteínas y anticuerpos. Ofrecemos una amplia selección de kits de marcaje de anticuerpos y proteínas Molecular Probes™ que se adaptan a su material de partida y a su configuración experimental. Consulte nuestros kits de marcaje de anticuerpos o utilice nuestra herramienta de selección de productos químicos de marcaje para conocer otras opciones. Para obtener más información sobre nuestros kits de marcaje, lea la sección 1 sobre "Kits para el marcaje de proteínas y ácidos nucleicos".
2 en el Manual de Sondas Moleculares™.
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Reactividad química: Amina
Emisión: 568 nm
Excitación: 559 nm
Etiqueta o colorante: BODIPY™ 558⁄568
Tipo de producto: Tinte
Cantidad: 5 mg
Fracción reactiva: éster activo, éster succinimidílico
Condición de envío: Temperatura ambiente
Tipo de etiqueta: Tintes BODIPY
Línea de productos: BODIPY™
Tamaño de la unidad: cada una