Fosfatasa alcalina termosensible Thermo Fisher, EF0651, FastAP (1 U/μL)

Thermo Fisher, EF0651, Fosfatasa Alcalina Termosensible FastAP (1 U/μL). La Fosfatasa Alcalina Termosensible FastAP de Thermo Scientific cataliza la liberación de grupos fosfato 5' y 3' del ADN, ARN y nucleótidos. Esta enzima también elimina grupos fosfato de las proteínas.
FastAP es una novedosa fosfatasa alcalina activa en todos los tampones de enzimas de restricción Thermo Scientific, así como en tampones de PCR. Desfosforila todo tipo de extremos de ADN (romos, salientes 5' y 3') en 10 minutos a 37 °C. La enzima se inactiva en 5 minutos a 75 °C (véase la Figura 1 en la Información Complementaria). Por lo tanto, no es necesario eliminar la fosfatasa alcalina antes de la ligadura.
Reflejos
•Enzima recombinante
•Desfosforilación rápida: 10 minutos a 37 °C
•Inactivación rápida y completa: 5 minutos a 75 °C
•Digestión y desfosforilación simultáneas del ADN del vector
•100% activo en enzimas de restricción y tampones de PCR
• Limpieza de PCR en conjunto con Exo I
•Desfosforilación de proteínasUn protocolo para todo tipo de extremos de ADN:
• aleros de 5'
• voladizos de 3'
• puntas romas
• Nucleótidos individuales Aplicaciones
• Desfosforilación del ADN del vector de clonación para evitar la recircularización durante la ligadura
• Digestión y desfosforilación simultáneas del ADN del vector.
• Limpieza del producto de PCR: degradación de nucleótidos antes de la secuenciación del producto de PCR
• Desfosforilación de los extremos 5' del ácido nucleico antes del marcaje con la polinucleótido quinasa T4
• Otras aplicaciones donde es necesaria la desfosforilación de sustratos de ADN y ARN
• Desfosforilación de proteínas Nota
La unión de la fosfatasa alcalina termosensible FastAP al ADN puede provocar un desplazamiento de banda en los geles de agarosa. Para evitarlo, incube las muestras con colorante de carga de ADN 6X y solución SDS a 65 °C durante 10 minutos y enfríelas en hielo antes de la electroforesis.
La fosfatasa alcalina termosensible FastAP es activa en todos los tampones de enzimas de restricción y puede añadirse directamente al ADN digerido. No es necesaria la inactivación térmica de la enzima de restricción antes de la reacción de desfosforilación.
Tampón compatible: tampón de PCR, tampón enzimático
Tipo de producto: Fosfatasa alcalina
Cantidad: 1.000 unidades
Concentración: 1 U/μL
Enzima: Fosfatasa
Tamaño de la unidad: cada una