Thermo Fisher, EL0012, ADN ligasa T4 (5 U/μL)

Thermo Fisher, EL0012, ADN ligasa T4 (5 U/μL). La ADN ligasa T4 de Thermo Scientific cataliza la formación de un enlace fosfodiéster entre los extremos 5'-fosfato y 3'-hidroxilo yuxtapuestos en ADN o ARN dúplex. Esta enzima repara las muescas monocatenarias en ADN, ARN o híbridos ADN/ARN dúplex. También une fragmentos de ADN con extremos cohesivos o romos, pero no tiene actividad en ácidos nucleicos monocatenarios.
La ADN ligasa T4 requiere ATP como cofactor.
Reflejos
• Activo en tampones de enzimas de restricción, PCR y RT de Themo Scientific (cuando se complementa con ATP)
• Rápida: la ligadura del extremo adhesivo se completa en 10 minutos a temperatura ambiente.
• Se suministra con solución de PEG para una ligadura eficiente de extremos romos. Aplicaciones
• Clonación de fragmentos de ADN generados por enzimas de restricción
• Clonación de productos de PCR
• Unión de enlaces o adaptadores de oligonucleótidos bicatenarios al ADN
• Mutagénesis dirigida al sitio
• Polimorfismo de longitud de fragmentos amplificados (AFLP)
• Detección de ARN mediada por ligasa (ver Referencia 3)
• Reparación de mellas en ADN dúplex, ARN o híbridos ADN/ARN
• Autocircularización del ADN lineal.
Incluye
• Ligasa de ADN T4
• Tampón de ligasa de ADN T4 10X
• Solución de PEG al 50% Notas
La unión de la ADN ligasa T4 al ADN puede provocar un desplazamiento de banda en los geles de agarosa. Para evitarlo, incube las muestras con solución de colorante de carga de ADN 6X y SDS a 70 °C durante 5 minutos o a 65 °C durante 10 minutos y enfríelas en hielo antes de la electroforesis.
• El volumen de la mezcla de reacción de ligadura no debe exceder el 10% del volumen celular competente en el proceso de transformación.
• Antes de la electrotransformación, retire la ADN ligasa T4 de la mezcla de ligación mediante columnas de centrifugación o extracción con cloroformo. El ADN extraído puede precipitarse aún más con etanol.
Tampón compatible: tampón de ligasa de ADN T4 10X
Tipo de producto: Ligasa de ADN T4
Cantidad: 5 x 1.000 unidades
Concentración: 5 U/μL
Enzima: ADN ligasa
Tamaño de la unidad: cada una