Kit de mutagénesis dirigida al sitio Phusion™ con células competentes DH10B, Thermo Fisher, F542

Kit de mutagénesis dirigida Phusion™ con células competentes DH10B. Este paquete incluye el kit de mutagénesis dirigida Phusion y células competentes DH10B, optimizadas para su uso con el kit. El kit de mutagénesis dirigida Phusion de Thermo Scientific es una herramienta versátil y eficaz para introducir mutaciones puntuales, inserciones o deleciones en cualquier tipo de ADN plasmídico. Con este kit, se amplifica el plásmido completo mediante cebadores fosforilados que introducen los cambios deseados. El producto de PCR lineal amplificado, que contiene la mutación deseada, se circulariza en una reacción de ligación de 5 minutos con ADN ligasa T4. El plásmido resultante puede transformarse posteriormente en células de E. coli. Se recomienda el uso de células competentes DH10B con el kit. La temperatura óptima de hibridación para las ADN polimerasas Phusion puede diferir significativamente de la de las polimerasas basadas en Taq. Para obtener resultados óptimos, comience calculando con precisión su Tm con nuestra calculadora de Tm.
• Método de amplificación exponencial robusto y confiable
• No hay requisitos, como vectores especiales, sitios de restricción o estado de metilación para el plásmido objetivo
• No es necesario destruir la plantilla inicial en un paso separado
•La ADN polimerasa de alta fidelidad Phusion Hot Start II minimiza las mutaciones secundarias no deseadas
• Amplificación de plásmidos grandes de hasta 10 kb
• La modificación de inicio en caliente de la polimerasa evita la amplificación de productos no específicos y la degradación no deseada de los cebadores antes del primer ciclo de PCR.
Ligasa de ADN T4 incluida en el kit; sin pasos de purificación antes ni después de la ligadura. Células competentes DH10B. Las células competentes Thermo Scientific DH10B son células de E. coli de alta eficiencia y químicamente competentes. La cepa DH10B es adecuada para la clonación de ADN con metilcitosina y metiladenina, lo que permite la clonación eficiente de ADN genómico procariota y eucariota. Estas células son ideales para la construcción de bibliotecas de ADNc mediante vectores derivados de plásmidos. Genotipo: F– mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ (ara-leu)7697 galU galK λ– rpsL(StrR) nupG.
• Alta eficiencia de transformación: >1x109 ufc/μg ADN pUC19
• Adecuado para aplicaciones rutinarias y de alto rendimiento de clonación y mutagénesis.
• Cómodo envase de dos reacciones por vial.
• Medio de crecimiento SOC incluido. Productos relacionados: Kit de mutagénesis dirigida al sitio Thermo Scientific Phusion sin células competentes. Tipo de célula: DH10B
Eficiencia: ≥1 x 10^9
Enzima: Máxima H Minus
Para uso con (aplicación): Mutagénesis
Capacidad de mutagénesis: mutagénesis de un solo sitio
Línea de productos: Phusion, Thermo Scientific™
Tipo de producto: Kit de mutagénesis dirigida
Cantidad: 20 Reacciones
Tipo de muestra: Productos de PCR
Condición de envío: Hielo seco
Formato: Kit
Tamaño de la unidad: cada una