Thermo Fisher, F750, MuA Transposasa

Los productos de transposones Thermo Scientific se basan en la maquinaria de transposición del bacteriófago Mu. Durante la fase lítica del ciclo de vida del fago, esta maquinaria replica su genoma transponiéndose repetidamente dentro del genoma del huésped. La reacción de transposición de Mu se ha modificado para convertirla en una reacción in vitro catalizada por una sola enzima: la transposasa MuA. En este sistema, una sola reacción in vitro puede generar más de un millón de clones de inserción de transposones.
El Sistema de Generación de Mutaciones (Kit MGS) y el Sistema de Generación de Detención (Kit STOP) se desarrollaron para el análisis funcional de proteínas. Estas nuevas herramientas de transposones permiten la creación de bibliotecas saturadas de proteínas mutadas en una sola reacción con menos tiempo de manipulación que cualquier otro método. La ubicación de la inserción del transposón en cada clon mutado puede mapearse mediante PCR o secuenciación. Con los kits MGS y STOP, miles de clones mutados están listos para estudios de expresión en tan solo 2 o 3 días.
El kit MGS contiene el conjunto completo de reactivos para la mutagénesis por barrido de enlaces basada en transposones de cualquier proteína diana. Los Entranceposones MGS están diseñados para realizar cambios sutiles en la estructura de una proteína diana mediante la inserción de enlaces de 15 pb en el marco de lectura del gen diana correspondiente. Esta inserción en el marco de lectura permite la conservación de secuencias posteriores.
Los posones de entrada STOPKit contienen codones de terminación traduccionales en los tres marcos de lectura dentro de la porción terminal de la secuencia del transposón. La modificación patentada del Sistema de Generación de Terminación permite generar una biblioteca saturada de deleciones C-terminales a partir de prácticamente cualquier proteína diana con una adición máxima de tres aminoácidos.
Características:
• Eficiente: cree bibliotecas de inserción saturadas para secuenciación y análisis de proteínas en una sola reacción
• Rápido: reduce el tiempo de intervención en comparación con los métodos convencionales.
• Aleatorio: elimina la preferencia del sitio objetivo o el punto caliente de inserción. Aplicaciones: El kit STOP genera proteínas truncadas para ensayos funcionales de:
• Enzimas
• Receptores
• Proteínas estructurales, etc.
El kit MGS genera inserciones aleatorias in vitro de quince pares de bases en cualquier ADN objetivo para:
• Generación rápida de bibliotecas de inserción de cinco aminoácidos en marco de cualquier proteína para análisis funcionales
• Mutagénesis rápida y aleatoria de promotores clonados y otras regiones reguladoras del ADN
• Inserción aleatoria de un sitio de enzima de restricción NotI en cualquier clon de ADN objetivoVentajas del kit MGS
• Miles de clones de inserción diferentes a partir de una única reacción
• Genera inserciones aleatorias de 5 aminoácidos en los 3 marcos de lectura
• Inserciones cortas en el marco; sin codones de parada
• Flexibilidad en el mapeo de mutantes de interés: las mutaciones se mapean fácilmente mediante NotI o PCR
• Más rápido y más eficaz que la mutagénesis por escaneo de enlazadores
• Kit STOP
• Biblioteca saturada de proteínas truncadas de una única reacción en dos días
• Codón de parada traduccional en los tres marcos de lectura
• La secuencia de ADN objetivo puede ser desconocida
• Más rápido y eficaz que los métodos convencionales.
• No se requieren primers específicosConcentración: 0.
22 μg/μL
Formato: Tubo
Tipo de producto: Productos de transposón
Material de partida: ADN
Volumen: 20 μL
Formulario: Solución
Velocidad de reacción: rápida
Tamaño de la unidad: cada una