Product Description
20 reacciones. Este paquete incluye el kit de clonación por PCR CloneJET (20 o 40 reacciones) y células competentes DH10B, optimizadas para su uso con el kit y que pueden transformarse directamente con el producto de ligación. El kit de clonación por PCR CloneJET de Thermo Scientific es un sistema avanzado de selección positiva para la clonación de alta eficiencia de productos de PCR generados con cualquier ADN polimerasa termoestable. Se puede clonar cualquier fragmento de ADN romo o con extremos pegajosos. El kit funciona bien con fragmentos de ADN fosforilados y no fosforilados. La ligación en el vector de selección positiva incluido tarda solo cinco minutos, lo que produce más del 99 % de clones recombinantes. Los productos de PCR con extremos romos generados con una enzima de corrección se ligan directamente al vector de clonación. Los productos de PCR generados con ADN polimerasas sin corrección de errores o mezclas de ADN polimerasas deben ser despuntados antes de la ligadura en una reacción de cinco minutos con la enzima termoestable de despuntado de ADN incluida en el kit. Las células competentes DH10B están optimizadas para su uso con el kit de clonación por PCR CloneJET y pueden transformarse directamente con el producto de ligadura. El kit de clonación por PCR CloneJET contiene el novedoso vector de clonación de selección positiva pJET1.2/blunt, listo para usar. El vector contiene un gen de enzima de restricción letal que se altera mediante la ligadura de un inserto de ADN en el sitio de clonación. Como resultado, solo las células bacterianas con plásmidos recombinantes pueden formar colonias. Las moléculas del vector pJET1.2/blunt recircularizadas que carecen de un inserto expresan una enzima de restricción letal que destruye la célula huésped de E. coli tras la transformación. Esta selección positiva acelera drásticamente el proceso de cribado de colonias y elimina los costes adicionales de la selección azul/blanca.
•Rápido: clonación por PCR en solo cinco minutos
• Máxima eficiencia: >99 % de clones positivos
•Sin antecedentes de clonación: vector de selección positiva
•Versátil: ideal para clonación de extremos romos o pegajosos
• Económico: sin costosas pruebas de detección azul/blanco. Las aplicaciones incluyen:
• Clonación de productos de PCR con extremos romos o con cola 3' dA de hasta 10 kb
• Clonación de fragmentos de ADN generados por enzimas de restricción
• Secuenciación de ADN clonado
Transcripción in vitro e in vivo de insertos clonados del promotor T7. Más información sobre el kit de clonación por PCR CloneJET › Células competentes DH10B. Las células competentes DH10B de Thermo Scientific son células de E. coli de alta eficiencia y químicamente competentes. La cepa DH10B es adecuada para la clonación de ADN con metilcitosina y metiladenina, lo que permite la clonación eficiente de ADN genómico procariota y eucariota. Estas células son ideales para la construcción de bibliotecas de ADNc mediante vectores derivados de plásmidos. Genotipo: F– mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ (ara-leu)7697 galU galK λ– rpsL(StrR) nupG.
• Alta eficiencia de transformación: >1x109 ufc/μg de ADN pUC19
• Adecuado para aplicaciones de clonación rutinarias y de alto rendimiento.
• Cómodo envase de dos reacciones por vial.
• Medio de crecimiento SOC incluido Productos relacionados Kit de clonación PCR CloneJET sin células competentes Sistema de clonación y expresión LICator LIC Cepa bacteriana o de levadura: DH10B
Resistencia bacteriana a los antibióticos: ampicilina (AmpR)
Tipo de célula: DH10B
Método de clonación: PCR roma, enzima de restricción/MCS
Formato: Kit
Tipo de muestra: Productos de PCR
Eficiencia: ≥1 x 10^9
Para usar con (aplicación): Clonación por PCR
Número de reacciones: 20 reacciones
Línea de productos: Thermo Scientific™
Tipo de producto: Kit de clonación por PCR
Cantidad: 20 Reacciones
Condición de envío: Hielo seco
Vector: pJET1.2/blunt
Tamaño de la unidad: cada una
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