Thermo Fisher, K2875J10, kit de clonación por PCR Zero Blunt™ TOPO™ para secuenciación, con One Shot™ TOP10 E. coli químicamente competente

10 reacciones. El kit de clonación por PCR Zero Blunt™ TOPO™ para secuenciación proporciona una estrategia de clonación altamente eficiente, de 5 minutos y un solo paso, para la inserción directa de productos de PCR de extremos romos, amplificados por polimerasa de corrección de pruebas, en un vector plasmídico para secuenciación. Cada kit utiliza el vector pCR™4Blunt-TOPO™ (ver figura) con sitios de cebadores de secuenciación especialmente diseñados que devuelven más secuencia de inserción y menos secuencia de vector de cada reacción. Estos kits incluyen todo lo necesario para clonar y seleccionar vectores recombinantes que contienen el fragmento de PCR de su elección. Vector pCR™4Blunt-TOPO™: optimizado para secuenciación. Hemos eliminado gran parte del sitio de clonación múltiple del vector pCR™4Blunt-TOPO™ para acortar la distancia entre los sitios de cebadores de secuenciación y el sitio de inserción a tan solo 33 pb. Esto significa que las reacciones de secuenciación dan menos secuencia de vector y más secuencia de inserción. El vector pCR™4Blunt TOPO™ contiene sitios para cuatro cebadores de secuenciación comunes: M13 directo, M13 inverso, T7 y T3. Los kits incluyen una alícuota de cada uno. Selección y manipulación de clones con pCR™4Blunt-TOPO™. El vector pCR™4Blunt-TOPO™ contiene marcadores de resistencia a ampicilina y kanamicina, así como una fusión del gen LacZα-ccdB para una selección positiva. El sitio de clonación múltiple minimizado del vector aún incluye sitios EcoRI flanqueantes para simplificar la escisión de los productos de PCR clonados y un sitio Sse8387I único para la generación de deleciones anidadas antes de la secuenciación. Los promotores T7 y T3 también están presentes para la transcripción in vitro. Clonación simplificada basada en TOPO™. Con la tecnología de clonación TOPO™, no se necesitan cebadores de PCR con secuencias específicas, procedimientos post-PCR, preparación de vectores ni otros pasos de manipulación de ADN que requieren mucho tiempo. Simplemente añada su reacción de PCR directamente al vector con topoisomerasa, incube durante 5 minutos y transforme las células competentes de E. coli. Clonación eficiente. Con hasta el 95 % de los clones con el inserto deseado, puede cribar menos clones, lo que le ahorra tiempo y dinero. El vector pCR™4Blunt-TOPO™ utilizado en este kit no tiene salientes para una ligadura eficiente de los productos de PCR creados mediante polimerasas termoestables de corrección que dejan productos de PCR con extremos romos. El estándar en clonación. En cuanto a la clonación, la tecnología de clonación TOPO™ ha sido un aliado confiable para miles de científicos durante más de diez años. Rápido, fácil de usar y eficiente, el clonaje TOPO™ se ha aplicado a numerosos vectores para una amplia gama de aplicaciones. Kit de clonación PCR Zero Blunt™ TOPO™ para secuenciación: formatos del kit. El kit de clonación PCR Zero Blunt™ TOPO™ para secuenciación se puede adquirir con una variedad de células competentes que ofrecen diferentes ventajas según sus necesidades:
• Clonación general: células TOP10 (n.º de cat. K2875-J10, K2875-20, K2875-40)
• Clonación de alta eficiencia: Celdas TOP10 Electrocomp™ (N.º de cat. K2880-20, K2880-40)
• Clonación general, resistencia al bacteriófago T1: DH5α-T1R (Cat. N.° K2895-20)
• Crecimiento rápido: Mach1™-T1R Químicamente competente E. coli (Cat. N.° K2835-20) Enlaces relacionados
•Servicios de construcción y clonación de vectores personalizados
Guía de selección del kit de purificación de ADN plasmídico
• Reactivos, instrumentos y suministros para PCR Cepa bacteriana o de levadura: TOP10
Tipo de célula: químicamente competente
Método de clonación: Blunt TOPO™
Para uso con (aplicación): Biología de la cromatina
Línea de productos: One Shot™
Tipo de producto: Kit de clonación por PCR
Promotor: T7, T3
Cantidad: 10 Reacciones
Vector: Vectores de clonación de ADN romos
Formato: Kit
Tamaño de la unidad: cada una