Kit de expresión TOPO™ direccional pBAD202 de Thermo Fisher, K420201

Kit de expresión pBAD202 Directional TOPO™. El uso de enzimas de restricción para clonar un gen en un vector de expresión a menudo obliga a comprometer la secuencia final del inserto (Figura 1A), especialmente cuando no existen sitios de restricción útiles cerca de la secuencia codificante del gen. Esto puede resultar en un espaciamiento subóptimo de los elementos de expresión o en la incorporación de residuos de aminoácidos no nativos, lo que puede reducir los niveles de expresión o provocar la producción de proteína no funcional.
Además de ser un método más eficaz de clonación, la clonación TOPO™ elimina estos posibles problemas de expresión. Los vectores de expresión TOPO™ permiten insertar la secuencia de ADN exacta que se necesita simplemente realizando PCR con cebadores diseñados adecuadamente. El producto de PCR se clona con alta eficiencia en tan solo cinco minutos en un vector de expresión activado por topoisomerasa I. El vector de expresión recombinante resultante contiene la secuencia exacta de ADN sin regiones no codificantes (Figura 1B).
Muchos de los potentes vectores de expresión de Invitrogen están disponibles adaptados para la clonación TOPO™ en un solo paso y la expresión de productos de PCR. Además, varios vectores de expresión están ahora adaptados para la clonación TOPO™ direccional, lo que permite utilizar polimerasas correctoras y clonar sus productos de PCR en una orientación específica.
Resistencia bacteriana a los antibióticos: kanamicina (KanR)
Cepa bacteriana o de levadura: LMG194, TOP10
Escisión: Sitio de reconocimiento de EK (enteroquinasa)
Sistema Constitutivo o Inducible: Inducible
Mecanismo de expresión: expresión celular
Sistema de expresión: E. coli
Agente inductor: arabinosa
Tipo de producto: Kit de expresión TOPO
Cantidad: 20 reacciones
Agente de selección (eucariota): Ninguno
Vector: pBAD
Método de clonación: TOPO direccional
Línea de productos: TOPO™
Promotor: araBAD
Etiqueta de proteína: Etiqueta His (6x), Etiqueta de epítopo V5, Tiorredoxina
Tamaño de la unidad: cada una