Thermo Fisher, K457501, Kit TOPO™ TA Cloning™ para secuenciación, con One Shot™ TOP10 E. coli químicamente competente

25 reacciones. Los kits TOPO™ TA Cloning™ para secuenciación ofrecen una estrategia de clonación altamente eficiente, de un solo paso y 5 minutos ('TOPO™ Cloning') para la inserción directa de productos de PCR amplificados por Taq-polimerasa en un vector plasmídico para secuenciación. Cada kit utiliza el vector pCR™4-TOPO™ TA con sitios de cebadores de secuenciación especialmente diseñados que generan más secuencia de inserto y menos secuencia de vector en cada reacción. Están disponibles con una variedad de células competentes, o sin células competentes, según sus necesidades y presupuesto. Estos kits incluyen todo lo necesario para clonar y seleccionar vectores recombinantes que contengan el fragmento de PCR de su elección. Características de los kits TOPO™ TA Cloning™ para secuenciación:
•Obtener más secuencia: permite más secuencia de inserción y menos secuencia de vector cuando se utilizan cebadores de secuenciación estándar
•Rápido y fácil: pase de la PCR a los clones en solo 3 pasos y en tan solo 5 minutos de tiempo práctico.
•Eficiente: obtenga hasta un 95 % de clones con el inserto correcto
•Probado: rendimiento confiable durante más de una década con más de 4000 citasKits TOPO™ TA Cloning™ para secuenciación: descripción generalVector: vector pCR™4-TOPO™ TA: vector de clonación optimizado para mejores resultados de secuenciaciónMétodo de clonación: TOPO™ TA Cloning™: ligadura de 5 minutos basada en topoisomerasa I de productos de PCR con salientes 3'A (amplificados con Taq) al vectorCélulas competentes: varias opciones: elija entre kits con células competentes generales, de alta eficiencia, resistentes a bacteriófagos T1 o de rápido crecimiento, o use las suyas propiasVector pCR™4-TOPO™ TA: optimizado para secuenciaciónHemos eliminado gran parte del sitio de clonación múltiple del vector pCR™4-TOPO™ TA para acortar la distancia entre los sitios de cebador de secuenciación y el sitio de inserción a tan solo 33 pb. Esto significa que las reacciones de secuenciación producen menos secuencia de vector y más secuencia de inserto. El vector pCR™4-TOPO™ TA tiene sitios para cuatro cebadores de secuenciación comunes: M13 directo, M13 inverso, T7 y T3. Los kits incluyen una alícuota de cada uno.
Selección y manipulación de clones pCR™4-TOPO™ TA. El vector pCR™4-TOPO™ TA contiene marcadores de resistencia a ampicilina y kanamicina, así como una fusión del gen LacZα-ccdB para la selección positiva y el cribado azul/blanco. El sitio de clonación múltiple minimizado del vector aún incluye sitios EcoRI flanqueantes para simplificar la escisión de los productos de PCR clonados y un sitio Sse8387I único para la generación de deleciones anidadas antes de la secuenciación. Los promotores T7 y T3 también están presentes para la transcripción in vitro.
Clonación simplificada basada en TOPO™. Con la tecnología de clonación TOPO™, no se necesitan primers de PCR con secuencias específicas, procedimientos post-PCR, preparación de vectores ni otros pasos de manipulación de ADN que requieren mucho tiempo. Simplemente añada su reacción de PCR directamente al vector con topoisomerasa, incube durante 5 minutos y transforme con las células competentes de E. coli proporcionadas.
Clonación eficiente. Con hasta el 95 % de clones con el inserto deseado, puede cribar menos clones y ahorrar tiempo y dinero. El vector pCR™4-TOPO™ TA utilizado en este kit incluye salientes 3'T para una ligación eficiente de productos de PCR amplificados por Taq, que contienen salientes 3'A.
El estándar en clonación. En materia de clonación, la tecnología TOPO™ ha sido un aliado confiable para miles de científicos durante más de diez años. Rápida, fácil de usar y eficiente, la clonación TOPO™ se ha aplicado a numerosos vectores para una amplia gama de aplicaciones.
Kits TOPO™ TA Cloning™ para secuenciación: opciones de kitEl kit TOPO™ TA Cloning™ para secuenciación se puede comprar con una variedad de células competentes que ofrecen diferentes ventajas según sus necesidades:
• Clonación general: TOP10 (n.º de cat. K4575-J10, K4575-01, K4575-40)
• Clonación de alta eficiencia: Celdas TOP10 Electrocomp™ (N.º de cat. K4580-01, K4580-40)
• Clonación general, resistencia al bacteriófago T1: DH5α-T1R (n.º de cat. K4595-01, K4595-40)
• Crecimiento rápido: Mach1™-T1R E. coli químicamente competente (n.° de cat. K4530-20)
• Proporcione el suyo propio: para mayor flexibilidad y ahorrar dinero (Cat. No. 450030) También ofrecemos una versión del kit que incluye un PureLink™ Quick Plasmid Miniprep Kit (Cat. No. K4575-02) para usar en el aislamiento de plásmidos recombinantes limpios y listos para secuenciar.
Enlaces relacionados
•Servicios de construcción y clonación de vectores personalizados
Guía de selección del kit de purificación de ADN plasmídico
• Reactivos, instrumentos y suministros para PCR Cepa bacteriana o de levadura: TOP10
Tipo de célula: químicamente competente
Método de clonación: TOPO™-TA
Para uso con (aplicación): Biología de la cromatina
Línea de productos: One Shot™
Tipo de producto: Kit de clonación
Cantidad: 25 Reacciones
Vector: Vectores de clonación TOPO-TA
Formato: Kit
Promotor: T7, T3
Tamaño de la unidad: cada una