Thermo Fisher, K4575J10, Kit TOPO™ TA Cloning™ para secuenciación, con One Shot™ TOP10 E. coli químicamente competente

10 reacciones. Los kits TOPO™ TA Cloning™ para secuenciación ofrecen una estrategia de clonación altamente eficiente, de 5 minutos y en un solo paso ('TOPO™ Cloning') para la inserción directa de productos de PCR amplificados por Taqpolimerasa en un vector plasmídico para secuenciación. Cada kit utiliza el vector pCR™4-TOPO™ TA con sitios de cebadores de secuenciación especialmente diseñados que generan más secuencia de inserto y menos secuencia de vector en cada reacción. Están disponibles con una variedad de células competentes, o sin células competentes, según sus necesidades y presupuesto. Estos kits incluyen todo lo necesario para clonar y seleccionar vectores recombinantes que contengan el fragmento de PCR de su elección. Características de los kits TOPO™ TA Cloning™ para secuenciación:
•Obtener más secuencia: permite más secuencia de inserción y menos secuencia de vector cuando se utilizan cebadores de secuenciación estándar
•Rápido y fácil: pase de la PCR a los clones en solo 3 pasos y en tan solo 5 minutos de tiempo práctico.
•Eficiente: obtenga hasta un 95 % de clones con el inserto correcto
•Probado: rendimiento confiable durante más de una década con más de 4000 citasKits TOPO™ TA Cloning™ para secuenciación: descripción generalVector: vector pCR™4-TOPO™ TA: vector de clonación optimizado para mejores resultados de secuenciaciónMétodo de clonación: TOPO™ TA Cloning™: ligadura de 5 minutos basada en topoisomerasa I de productos de PCR con salientes 3'A (amplificados con Taq) al vectorCélulas competentes: varias opciones: elija entre kits con células competentes generales, de alta eficiencia, resistentes a bacteriófagos T1 o de rápido crecimiento, o use las suyas propiasVector pCR™4-TOPO™ TA: optimizado para secuenciaciónHemos eliminado gran parte del sitio de clonación múltiple del vector pCR™4-TOPO™ TA para acortar la distancia entre los sitios de cebador de secuenciación y el sitio de inserción a tan solo 33 pb. Esto significa que las reacciones de secuenciación generan menos secuencia de vector y más secuencia de inserto. El vector pCR™4-TOPO™ TA contiene sitios para cuatro cebadores de secuenciación comunes: M13 directo, M13 inverso, T7 y T3. Los kits incluyen una alícuota de cada uno. Selección y manipulación de clones pCR™4-TOPO™ TA. El vector pCR™4-TOPO™ TA contiene marcadores de resistencia a ampicilina y kanamicina, así como una fusión del gen LacZα-ccdB para la selección positiva y el cribado azul/blanco. El sitio de clonación múltiple minimizado del vector aún incluye sitios EcoRI flanqueantes para simplificar la escisión de los productos de PCR clonados y un sitio Sse8387I único para la generación de deleciones anidadas antes de la secuenciación. Los promotores T7 y T3 también están presentes para la transcripción in vitro. Clonación simplificada basada en TOPO™. Con la tecnología de clonación TOPO™, no se necesitan cebadores de PCR con secuencias específicas, procedimientos post-PCR, preparación de vectores ni otros pasos de manipulación de ADN que requieren mucho tiempo. Simplemente añada su reacción de PCR directamente al vector con topoisomerasa, incube durante 5 minutos y transforme con las células competentes de E. coli proporcionadas. Clonación eficiente. Con hasta el 95 % de los clones con el inserto deseado, puede cribar menos clones y ahorrar tiempo y dinero. El vector pCR™4-TOPO™ TA utilizado en este kit incluye salientes 3'T para una ligadura eficiente de productos de PCR amplificados por Taq, que contienen salientes 3'A. El estándar en clonación. En cuanto a clonación, la tecnología de clonación TOPO™ ha sido un aliado confiable para miles de científicos durante más de diez años. Rápida, fácil de usar y eficiente, la clonación TOPO™ se ha aplicado a numerosos vectores para una amplia gama de aplicaciones. Kits TOPO™ TA Cloning™ para secuenciación: opciones de kitEl kit TOPO™ TA Cloning™ para secuenciación se puede comprar con una variedad de células competentes que ofrecen diferentes ventajas según sus necesidades:
• Clonación general: TOP10 (n.º de cat. K4575-J10, K4575-01, K4575-40)
• Clonación de alta eficiencia: Celdas TOP10 Electrocomp™ (N.º de cat. K4580-01, K4580-40)
• Clonación general, resistencia al bacteriófago T1: DH5α-T1R (n.º de cat. K4595-01, K4595-40)
• Crecimiento rápido: Mach1™-T1R E. coli químicamente competente (n.° de cat. K4530-20)
• Proporcione su propio kit: para mayor flexibilidad y ahorro (n.° de cat. 450030). También ofrecemos una versión del kit que incluye un kit PureLink™ Quick Plasmid Miniprep (n.° de cat. K4575-02) para aislar plásmidos recombinantes limpios y listos para secuenciar. Enlaces relacionados.
•Servicios de construcción y clonación de vectores personalizados
Guía de selección del kit de purificación de ADN plasmídico
• Reactivos, instrumentos y suministros para PCR Cepa bacteriana o de levadura: TOP10
Tipo de célula: químicamente competente
Método de clonación: TOPO™-TA
Para uso con (aplicación): Biología de la cromatina
Línea de productos: One Shot™
Tipo de producto: Kit de clonación
Cantidad: 10 Reacciones
Vector: Vectores de clonación TOPO-TA
Formato: Kit
Promotor: T7, T3
Tamaño de la unidad: cada una