Kit de ensayo FRET de BACE1 (β-secretasa) Thermo Fisher, P2985, rojo

Kit de ensayo FRET para BACE1 (β-secretasa), rojo. BACE1 (β-secretasa) es una enzima clave que participa en la producción de péptidos beta-amiloide (Abeta) presentes en las placas amiloides extracelulares de la enfermedad de Alzheimer (EA). En algunos casos, la EA familiar de inicio temprano puede atribuirse a una mutación "sueca" en la proteína precursora amiloide (APP), que potencia drásticamente la escisión de esta proteína por BACE1. Esta y otras evidencias genéticas y patológicas han dado lugar a enfoques terapéuticos centrados en la inhibición de BACE1 y otras enzimas que escinden la APP, como la gamma-secretasa. El kit de ensayo de transferencia de energía por resonancia de fluorescencia (FRET) para BACE1 proporciona un método sensible y eficaz para la detección de posibles inhibidores de BACE1. Este kit utiliza BACE1 purificada expresada en baculovirus y un nuevo sustrato peptídico FRET rojo basado en el mutante "sueco".
El kit de ensayo BACE1 FRET ofrece:
• Emisión roja para reducir la interferencia compuesta
• Excitación a 545 nm y emisión de lectura a 585 nm
• Un ensayo homogéneo, rápido y fácil de usar que se realiza en solución.
• Formato versátil para cribado de alto rendimiento
• Resultados estables: las mediciones se pueden realizar hasta por 24 horas. El principio del ensayo BACE1 FRET es el siguiente: el sustrato peptídico se sintetiza con dos fluoróforos, un donante fluorescente (un derivado de rodamina (Rh)) y un aceptor de extinción patentado. La distancia entre estos dos grupos se ha seleccionado de modo que, tras la excitación luminosa, la energía de fluorescencia del donante (D) se extingue significativamente por el aceptor (A) a través de un fenómeno mecánico cuántico conocido como transferencia de energía de resonancia (Figura 1). Tras la escisión por la proteasa, el fluoróforo se separa del grupo de extinción, restaurando el rendimiento de fluorescencia completo del donante. Por lo tanto, un sustrato peptídico débilmente fluorescente se vuelve altamente fluorescente tras la escisión enzimática; el aumento de la fluorescencia está relacionado linealmente con la tasa de proteólisis.
Fuente de la enzima BACE1: Se expresó una secuencia de ADNc que codifica los aminoácidos 1-460 de la BACE1 humana, correspondiente al ectodominio, en células de insecto recombinantes infectadas con baculovirus. La BACE1 purificada existe como proBACE1, con un peso molecular aparente de 55 kDa y una secuencia N-terminal de TQHGIRLPLR.
Ensayo: Ensayo de β-secretasa
Para usar con (aplicación): FRET
Tipo de producto: Kit de ensayo FRET
Cantidad: 400 x 40 μL Ensayos
Condición de envío: Hielo seco
Propiedades del sustrato: sustrato basado en péptidos
Tipo de sustrato: sustrato de beta-secretasa
Objetivo: Beta Secretasa (BACE1)
Tamaño de la unidad: cada una