Thermo Fisher, PV4548, Kit de ensayo de coactivador LanthaScreen™ TR-FRET PPAR gamma, cabra

Kit de ensayo de coactivador LanthaScreen™ TR-FRET PPAR gamma, cabra. Este kit contiene anticuerpo anti-GST de tuberculosis de cabra; los demás componentes son los mismos que los del kit A15126: El kit de ensayo de coactivador LanthaScreen™ TR-FRET PPAR gamma proporciona un método sensible y robusto para el cribado de alto rendimiento de posibles ligandos de PPAR gamma como agonistas o antagonistas del reclutamiento de coactivadores dependientes de ligando. El kit utiliza un anticuerpo anti-GST marcado con terbio (Tb), un péptido coactivador marcado con fluoresceína y un dominio de unión al ligando del receptor activado por el proliferador de peroxisomas (PPAR gamma-LBD) marcado con glutatión-S-transferasa (GST), en un formato de ensayo homogéneo de mezcla y lectura.
Modo agonista. Para ejecutar el ensayo LanthaScreen™ TR-FRET de coactivador del receptor gamma activado por proliferador de peroxisomas en modo agonista (para identificar compuestos agonistas), se añade PPAR gamma-LBD a los compuestos de prueba del ligando, seguido de una mezcla del péptido coactivador de fluoresceína y el anticuerpo anti-Tb GST. Tras un periodo de incubación a temperatura ambiente, se calcula la relación de emisión TR-FRET 520:495 y se utiliza para determinar la CE50 a partir de una curva dosis-respuesta del compuesto. Basándose en la biología de la interacción entre PPAR gamma y el péptido coactivador, esta CE50 del ligando es un valor compuesto que representa la cantidad de ligando necesaria para unirse al receptor, efectuar un cambio conformacional y reclutar el péptido coactivador (Figura 1).
Modo antagonista. Cuando el ensayo LanthaScreen™ TR-FRET del coactivador del receptor gamma activado por proliferadores de peroxisomas se ejecuta en modo antagonista (para identificar compuestos antagonistas), se añade PPAR gamma-LBD a los compuestos de prueba del ligando, seguido de una mezcla de agonista, péptido coactivador de fluoresceína y anticuerpo anti-Tb GST. La concentración de agonista utilizada en este modo es la CE80, determinada al ejecutar primero el ensayo en modo agonista (Figura 2).
Contenido y almacenamiento: El kit de ensayo LanthaScreen™ TR-FRET PPARγ Coactivator contiene la proteína PPAR gamma-LBD (GST), el péptido coactivador TRAP220/DRIP-2 marcado con fluorescencia, el anticuerpo anti-Tb GST y soluciones tampón. Conserve los componentes como se indica en el protocolo del ensayo (-80 °C, -20 °C o +4 °C).
Entrada de ensayo: Interacción correguladora bioquímica
Método de detección: fluorescencia
Para usar con (aplicación): Ensayo de interacción de cofactores, TR-FRET
Para usar con (equipo): lector de microplacas
ID del gen (Entrez): 5468
Ligando: PPAR Gamma
Número de ensayos: 800 ensayos de 20 μL
Embalaje: Placa de 384 pocillos
Tipo de producto: Kit de ensayo de coactivador de PPAR gamma TR-FRET
Cantidad: 800 ensayos de 20 μL
Lectura: Punto final
Condición de envío: Hielo seco
Entrada objetivo: PPARG, PPAR gamma, NR1C3
Conjugado: Tb (Terbio)
Línea de productos: LanthaScreen™
Tamaño de la unidad: cada una