Thermo Fisher, PV4684, Kit de ensayo de coactivador de PPAR alfa LanthaScreen™ TR-FRET, cabra

Kit de ensayo LanthaScreen™ TR-FRET PPAR alfa coactivador, cabra. Este kit contiene anticuerpo anti-GST de tuberculosis de cabra; los demás componentes son los mismos que los del kit A15133: El ensayo LanthaScreen™ TR-FRET PPAR (receptor activado por el proliferador de peroxisomas) alfa coactivador proporciona un método sensible y robusto para el cribado de alto rendimiento de posibles ligandos de PPAR alfa como agonistas o antagonistas del reclutamiento de coactivadores dependientes de ligando. El kit utiliza un anticuerpo anti-GST marcado con terbio (Tb), un péptido coactivador marcado con fluoresceína y un dominio de unión al ligando de PPAR alfa recombinante humano (PPAR alfa-LBD) marcado con glutatión-S-transferasa (GST) en un formato de ensayo homogéneo de mezcla y lectura.
Modo agonista: Al ejecutar el ensayo LanthaScreen™ TR-FRET PPAR alfa coactivador en modo agonista (para identificar compuestos agonistas), se añade PPAR alfa-LBD a los compuestos de prueba del ligando, seguido de una mezcla del péptido coactivador con fluoresceína y anticuerpo anti-GST marcado con Tb. Tras un periodo de incubación a temperatura ambiente, se calcula la relación TR-FRET de 520 nm/495 nm, que puede utilizarse para determinar la CE50 a partir de una curva dosis-respuesta del compuesto. Basándose en la biología de la interacción entre el PPAR alfa y el péptido coactivador, esta CE50 del ligando es un valor compuesto que representa la cantidad de ligando necesaria para unirse al receptor, efectuar un cambio conformacional y reclutar el péptido coactivador (véase la Figura 1).
Modo antagonista: Cuando el ensayo LanthaScreen™ TR-FRET de coactivador de PPAR alfa se ejecuta en modo antagonista (para identificar compuestos antagonistas), se añade PPAR alfa-LBD a los compuestos de prueba del ligando, seguido de una mezcla de agonista, péptido coactivador de fluoresceína y anticuerpo anti-GST marcado con Tb (Figura 2). La concentración de agonista utilizada en este modo es la concentración CE80, determinada al ejecutar primero el ensayo en modo agonista.
Contenido y almacenamiento: El kit de ensayo LanthaScreen™ TR-FRET del coactivador de PPAR alfa contiene la proteína PPAR alfa-LBD (GST), un péptido coactivador PGC1a marcado con fluorescencia, un anticuerpo anti-GST marcado con Tb y soluciones tampón. Conserve los componentes como se indica en el protocolo del ensayo (-80 °C, -20 °C o 4 °C).
Entrada de ensayo: Interacción correguladora bioquímica
Método de detección: fluorescencia
Para usar con (aplicación): Ensayo de interacción de cofactores, TR-FRET
Para usar con (equipo): lector de microplacas
ID del gen (Entrez): 5465
Ligando: PPAR alfa
Embalaje: Placa de 384 pocillos
Tipo de producto: Kit de ensayo del coactivador TR-FRET PPAR alfa
Cantidad: 800 x 20 μL Ensayos
Lectura: Punto final
Condición de envío: Hielo seco
Entrada objetivo: PPARA, PPAR alfa, NR1C1
Conjugado: Tb (Terbio)
Línea de productos: LanthaScreen™
Tamaño de la unidad: cada una