Thermo Fisher, SD0061, ADN pUC19

Thermo Fisher, SD0061, ADN pUC19. El vector pUC19 de Thermo Scientific es un plásmido de E. coli pequeño y con un alto número de copias, de 2686 pb de longitud. Contiene el mismo sitio de clonación múltiple (MCS) que el vector pUC18, excepto que está dispuesto en orientación opuesta.
Reflejos
• Purificado por cromatografía utilizando tecnología patentada propia.
• Más del 90% en forma superenrollada
• Aislado de E.
coli(dam+,dcm+)
• Para la secuencia de ADN pUC18, la secuencia de ADN pUC19, el análisis de secuencias y la creación de mapas, consulte la herramienta gratuita REviewer en línea.
Aplicaciones
• Clonación
• Secuenciación de ADN de inserción, ADN pUC18: Preparación de estándares de peso molecular de ADN. Contenido del plásmido pUC18/19 y notas de uso: los plásmidos pUC18/19 contienen:
• El replicón pMB1, responsable de la replicación del plásmido (fuente: plásmido pBR322). El alto número de copias de los plásmidos pUC se debe a la ausencia del gen terop y a una única mutación puntual en el replicón pMB1.
• El teblagen, que codifica la betalactamasa, confiere resistencia a la ampicilina (fuente: plásmido pBR322). Se diferencia del pBR322 por dos mutaciones puntuales.
• La región deE.
Lacoperón de coli contiene un sitio de unión a la proteína CAP, el promotor Plac, el sitio de unión del lacrepresor y la porción 5'-terminal del gen lacZ, que codifica el fragmento N-terminal de la beta-galactosidasa (fuente: M13mp18/19). Este fragmento, cuya síntesis puede ser inducida por IPTG, es capaz de complementación intraalélica (alfa) con una forma defectuosa de la beta-galactosidasa codificada por el huésped (mutación delta(lacZ)M15). En presencia de IPTG, las bacterias sintetizan ambos fragmentos de la enzima y forman colonias azules en medios con X-Gal. La inserción de ADN en el MCS ubicado dentro del gen lacZ (los codones 6-7 de lacZ son reemplazados por MCS) inactiva el fragmento N-terminal de la beta-galactosidasa y anula la complementación alfa. Por lo tanto, las bacterias portadoras de plásmidos recombinantes dan lugar a colonias blancas. El mapa muestra las enzimas que cortan el ADN de pUC18 una vez. Las enzimas producidas por Thermo Scientific se muestran en naranja. Las coordenadas se refieren a la posición del primer nucleótido en cada secuencia de reconocimiento.
Las posiciones exactas de los elementos genéticos se muestran en el mapa (incluidos los codones de terminación). Los nucleótidos 2486-2418 del gen bla (cadena complementaria) codifican un péptido señal. El polipéptido LacZ, correspondiente a la beta-galactosidasa wt y esencial para el cribado azul/blanco, termina en la posición 236 del nt (cadena complementaria). Otros 30 codones en el mismo marco de lectura se derivan de pBR322. La región rep indicada es suficiente para promover la replicación. La replicación del ADN se inicia en la posición 866 (± 1) y continúa en la dirección indicada. Los plásmidos que portan los replicones pMB1 y ColE1 son incompatibles, pero son totalmente compatibles con los que portan el replicón p15A (pACYC177, pACYC184). Los plásmidos derivados de pMB1 pueden amplificarse con cloranfenicol.
Método de clonación: enzima de restricción/MCS
Concentración: 0.
5 μg/μL
Tipo de producto final: ADN
Para usar con (aplicación): Clonación
Tipo de producto: ADN
Cantidad: 50 μg
Tipo de muestra: ADN
Vector: pUC19
Tamaño de la unidad: 50 µg