Thermo Fisher, SD0141, ADN pTZ19R

Los pTZ19R/U de Thermo Scientific son pequeños fagómidos de 2862 pb de longitud, construidos mediante la inserción del ADN de la región intergénica (IG) del fago f1 en topUC19 y la secuencia promotora T7 cerca del MCS de pUC19. Los fagómidos difieren en la orientación de la región IG f1 clonada. Están diseñados para la clonación de ADN, la secuenciación didesoxi de ADN, la mutagénesis in vitro y la transcripción in vitro en un solo sistema. Una cepa huésped que albergue estos fagómidos producirá ADN monocatenario si se superinfecta con el fago auxiliar M13K07. Características destacadas.
• Aislado de E. coli (dam+, dcm+)
• Más del 90% en forma superenrollada
• Aislado de E. coli (dam+,dcm-)
Para secuencias de ADN, análisis de secuencias y creación de mapas, consulte la herramienta gratuita REVIEWER en línea. Aplicaciones.
• Clonación
• Secuenciación de ADN de inserción, transcripción in vitro, contenido de pTZ19R y notas de uso: los fagémidos pTZ19R/U contienen:
• El replicón pMB1, responsable de la replicación del fagémido (fuente: plásmido pUC19)
• Theblagene, que codifica la beta-lactamasa, que confiere resistencia a la ampicilina (fuente: plásmido pUC19)
• La región de E. colioperonlac que contiene un sitio de unión a la proteína CAP, el promotor Plac, el sitio de unión del represor lacre y la parte 5'-terminal del gen lacZ, que codifica el fragmento N-terminal de la beta-galactosidasa (fuente: pUC19). Este fragmento permite el cribado azul/blanco de fagémidos recombinantes de la misma manera que se describe en la sección pUC18/19.
• Un promotor T7 insertado cerca del MCS de pUC19, lo que permite la síntesis in vitro de grandes cantidades de ARN específico.
• La región intergénica del fago f1 que lleva las secuencias requeridas incis para la iniciación y terminación de la síntesis de ADN del fago f1 (cadenas (+ y -) y para empaquetar el ADN en partículas de bacteriófagos. La síntesis de ADN monocatenario (más) requiere las proteínas de los genes II, X y V codificadas por el fago. Se inicia en ori (+) y procede en la dirección indicada. La conversión de cadenas de ADN más a ADN bicatenario no requiere ninguno de los genes del fago. La síntesis de ADN se inicia mediante un cebador de ARN de 30 nucleótidos sintetizado por la ARN polimerasa del huésped y que comienza en ori (-). El mapa muestra las enzimas que cortan el ADN pTZ19R una vez. Las enzimas producidas por Thermo Scientific se muestran en naranja. Las coordenadas se refieren a la posición del primer nucleótido en cada secuencia de reconocimiento. Las posiciones exactas de los elementos genéticos se muestran en el mapa (codones de terminación incluidos). Los nucleótidos 2732-2664 del gen Thebla (cadena complementaria) codifican un péptido señal. El polipéptido LacZ, correspondiente a la beta-galactosidasa wt y esencial para el cribado azul/blanco, termina en la posición nt 458 (cadena complementaria). Los aminoácidos restantes en el marco de lectura de LacZ están codificados por el ADN f1. La región de replicación indicada es suficiente para promover la replicación. La replicación del ADN se inicia en la cadena complementaria de ADN en la posición 1112 (± 1) y continúa en la dirección indicada. Los fagémidos y plásmidos que contienen los replicones pMB1 y ColE1 son incompatibles entre sí, pero son totalmente compatibles con los que contienen el replicón p15A (pACYC177, pACYC184). Los plásmidos derivados de pMB1 pueden amplificarse con cloranfenicol. Método de clonación: Enzima de restricción/MCS.
Concentración: 0,5 μg/μL
Tipo de producto final: ADN
Para usar con (aplicación): Clonación
Tipo de producto: ADN
Cantidad: 50 μg
Tipo de muestra: ADN
Vector: pTZ19R
Tamaño de la unidad: 50 µg