Thermo Fisher, V600520, vector de expresión de la recombinasa pOG44 Flp

Vector de expresión pOG44 Flp-Recombinasa. Además del vector original pcDNA™5/FRT, existen cuatro vectores de expresión Flp-In™ adicionales: pcDNA5/FRT/V5-His-TOPO™, pSecTag/FRT/V5-His-TOPO™, pEF5/FRT/V5-DEST™ y pEF5/FRT/V5-D-TOPO™ (Figura 1), disponibles para clonación y expresión en el sistema Flp-In™. Estos vectores ofrecen diversas opciones de clonación y diferentes tipos de promotores. Incluyen las siguientes características:
• Sitio objetivo de la recombinasa Flp (FRT) para una integración eficiente en las líneas celulares Flp-In™
• Gen de resistencia a la higromicina para una selección conveniente de integrantes
• Etiqueta V5 C-terminal para una fácil detección de proteínas de fusión con el anticuerpo anti-V5
Etiqueta 6xHis (solo vectores pcDNA5/FRT/V5-His-TOPO™ y pSecTag/FRT/V5-His-TOPO™) para la purificación rápida de proteínas de fusión en resina quelante de níquel. Todos los vectores contienen el promotor de alto nivel CMV o EF-1α. Además, pSecTag/FRT/V5-His-TOPO™ contiene la secuencia líder de Igκ para la secreción de la proteína recombinante.
Opciones de entrada: pcDNA™5/FRT es adecuado para la clonación mediada por digestión de restricción. Los otros cuatro vectores de expresión Flp-In™ ofrecen dos opciones rápidas para la clonación en un vector de expresión Flp-In™:
Clonación TOPO™ en cinco minutos. Los kits de expresión pcDNA™5/FRT/V5-His y pSecTag/FRT/V5-His TOPO™ TA permiten la clonación en cinco minutos de productos de PCR amplificados por Taq directamente en un vector de expresión Flp-In™. El kit de expresión pEF5/FRT/V5 Directional TOPO™ permite la clonación direccional en cinco minutos de productos de PCR generados con una enzima correctora. Con la clonación Directional TOPO™, más del 90 % de los clones resultantes tendrán la orientación correcta para la expresión, lo que reduce el tiempo dedicado al cribado de colonias.
•Fácil recombinación en un vector Gateway™. El vector pEF5/FRT/V5-DEST™ es compatible con la tecnología Gateway™* para facilitar la transferencia del gen de interés a diferentes vectores o sistemas hospedadores. La rápida y eficiente reacción de recombinación de Gateway™ puede realizarse simultáneamente con múltiples vectores de destino, lo que le ahorra tiempo al trabajar con diferentes sistemas.
Selección de promotores: Los vectores de expresión Flp-In™ están disponibles con el promotor CMV o EF-1α. Los vectores pEF5/FRT/V5-DEST™ y pEF5/FRT/V5-D-TOPO™ contienen el promotor humano EF-1α para impulsar la expresión del gen de interés. El promotor EF-1α se expresa en una amplia gama de tipos celulares de mamíferos, incluyendo aquellos donde la expresión del promotor CMV está ausente o es inconsistente. Este promotor puede ser más apropiado para la expresión génica a largo plazo en algunos tipos celulares y se recomienda para la expresión en las líneas celulares Flp-In™ prefabricadas BHK y 3T3. Los vectores pcDNA5/FRT/V5-His-TOPO™ y pSecTag/FRT/V5-His-TOPO™ contienen el promotor CMV para una expresión constitutiva de alto nivel del gen de interés en la mayoría de los tipos celulares.
Sistema Constitutivo o Inducible: Constitutivo
Tipo de administración: Transfección
Para usar con (aplicación): Integración dirigida
Tipo de producto: Vector de expresión del sistema Flp-In
Cantidad: 20 μg
Agente de selección (eucariota): Ninguno
Vector: pOG44
Método de clonación: TOPO, Gateway
Línea de productos: Flp-In™
Promotor: CMV
Etiqueta de proteína: Sin etiquetar
Tamaño de la unidad: 20 µg