Reactivos y kits de biología molecular Thermo Fisher

Esta colección reúne los principales reactivos y kits de biología molecular de Thermo Fisher, utilizados desde la muestra hasta el resultado: extracción de ADN/ARN, síntesis de ADNc, PCR/qPCR, clonación, electroforesis y análisis básico. Como distribuidor, Iright ofrece una amplia gama de referencias de Thermo Fisher con documentación y soporte técnico para que pueda seleccionar con confianza y agilizar el proceso de planificación a compra.

Alcance de la colección: Extracción de ADN/ARN, PCR/qPCR, Clonación y análisis

En la investigación rutinaria y el desarrollo de métodos, usted confía en productos químicos fiables que funcionan de forma consistente en sus instrumentos y muestras. Esta página organiza las líneas de Thermo Fisher de uso frecuente por flujo de trabajo para que pueda acceder a lo que necesita, comparar los elementos esenciales y descargar los documentos adecuados para su revisión interna.

• Extracción y purificación de ácidos nucleicos (basadas en columnas y perlas magnéticas; opciones compatibles con la automatización)

• Síntesis de ADNc y RT-PCR (sistemas SuperScript™ IV)

• Mezclas maestras para PCR y qPCR (químicas SYBR™ y sonda/TaqMan™; enzimas de alta fidelidad y de arranque en caliente)

• Clonación y ensamblaje (TOPO™ TA, GeneArt™ Gibson Assembly®; células competentes)

• Electroforesis y visualización (herramientas de agarosa, escalas, tinción segura SYBR™)

• Cuantificación y control de calidad (ensayos Qubit™ dsDNA)

Guía de flujo de trabajo: Elija reactivos de extracción de ADN/ARN, PCR/qPCR y clonación

Comience con el tipo de muestra y la lectura posterior, y luego adapte la química. Considere la sensibilidad, la carga de inhibidores y si automatizará el proceso. Utilice qPCR basada en sonda para obtener la máxima especificidad, polimerasas de alta fidelidad antes de la clonación o secuenciación, y extracción con microesferas magnéticas cuando necesite rendimiento y reproducibilidad.

Partidos rápidos (objetivo → solución sugerida):

• ARN/ADN viral de hisopos o VTM → Kit de aislamiento de ácidos nucleicos virales/patógenos MagMAX™ (listo para automatización, compatible con qPCR/NGS).

• Objetivos de bajo número de copias y ARN rico en inhibidores → Sistema de síntesis de primera cadena SuperScript™ IV (alta tolerancia a los inhibidores) + mezcla maestra de qPCR basada en sonda.

• Amplificación precisa para clonación/NGS → Polimerasa de alta fidelidad Platinum™ SuperFi™ II o Phusion™.

• qPCR de detección vs. confirmación → Mezcla maestra SYBR™ Green para cribados rápidos; Mezcla maestra avanzada TaqMan™ Fast para mayor especificidad y multiplexación.

• Clonación multifragmento sin fisuras → Kits GeneArt™ Gibson Assembly® HiFi o mezcla maestra; utilice TOPO™ TA para una clonación rápida de productos de PCR.

Productos y SKU representativos

Los siguientes elementos representan las opciones más comunes en cada paso. A menos que Thermo Fisher indique explícitamente lo contrario, trátelos como RUO . Utilice los enlaces de su lista de verificación interna para obtener hojas de datos, instrucciones de uso y hojas de datos de seguridad (SDS) para su aprobación.

Notas de compatibilidad e instrumentos para productos químicos de qPCR y polimerasas

Pequeñas diferencias químicas y requisitos de referencia pasiva pueden afectar los resultados en diferentes plataformas. Utilice esta sección para armonizar los protocolos entre instrumentos y ensayos, minimizando la reoptimización y reduciendo las repeticiones en su programa de laboratorio.

• SYBR™ vs. TaqMan™: Las mezclas SYBR™ Green son ideales para el cribado rápido y flujos de trabajo con presupuesto ajustado; TaqMan™, basado en sondas, mejora la especificidad y permite la duplexación/multiplexación cuando los objetivos o los fondos son complejos. Utilice curvas de fusión para los ensayos SYBR™; diseñe sondas para evitar SNP e indeles en regiones críticas.

• Referencia pasiva/filtros: Confirme el manejo de ROX/referencia pasiva en el software de su instrumento; la mayoría de los sistemas Applied Biosystems™ son sencillos. Al cambiar de plataforma, valide los cambios de Ct y las llamadas de línea base con 2 o 3 genes de control.

• Consejos para PCR de alta fidelidad: Para amplicones de grado clonal, elija SuperFi™ II o Phusion™. Comience con el tampón recomendado (HF o GC), reduzca el número de ciclos y verifique el tamaño del fragmento con una escala antes de la limpieza. Para dianas ricas en GC, incluya DMSO por IFU.

Instantáneas de aplicaciones: RT-qPCR, clonación y electroforesis

Estos breves escenarios muestran cómo los kits se alinean con los objetivos comunes. Adapte los parámetros a la calidad de su plantilla, la abundancia del objetivo y la configuración del instrumento, y mantenga un breve ciclo de validación antes de escalar.

• Detección de ARN viral de bajo número de copias mediante RT-qPCR : extraiga el hisopo/VTM con MagMAX Viral/Pathogen ; sintetice el ADNc con SuperScript IV y ezDNase; cuantifique con TaqMan Fast Advanced Master Mix en su sistema de tiempo real. Incluya un control de extracción negativo y un gen de control humano para la verificación del proceso.

• Generación precisa de amplicones antes de la clonación/NGS : Amplifique con Platinum SuperFi II (o Phusion ) utilizando el tampón HF del fabricante; confirme en agarosa con 1 kb Plus DNA Ladder ; limpie antes de la ligadura o el ensamblaje de Gibson. Si es necesario, añada protuberancias A para la clonación TA.

• Construcción fluida de vectores multifragmentarios : Ensamble de 2 a 6 insertos con GeneArt Gibson Assembly HiFi ; transforme el ElectroMAX DH10B incluido en el kit; cribe colonias mediante PCR de colonias y confirme mediante Sanger. Utilice amplicones de alta fidelidad y solapamientos de 20 a 40 pb para un ensamblaje robusto.

• Cuantificación precisa de ADN y visualización segura : cuantifique el ADN purificado con Qubit dsDNA HS para evitar sobrecarga o subcarga; tiñe los geles con SYBR Safe para una detección sensible y menos peligrosa bajo luz azul o UV.

Preguntas frecuentes sobre reactivos y kits de biología molecular

Antes de realizar un pedido, los equipos suelen preguntar sobre la fidelidad, la elección de la química y los límites entre RUO y IVD. Sea breve en sus respuestas para que puedan reutilizarse en notas internas o solicitudes de compra.

• ¿Cuándo debo elegir una polimerasa de alta fidelidad?
  Utilice SuperFi™ II o Phusion™ al clonar o secuenciar el producto, o cuando las plantillas sean complejas o ricas en GC. Obtendrá corrección de pruebas y tasas de error más bajas que con el Taq estándar, lo que reduce los fallos posteriores.

• SYBR™ vs. TaqMan™: ¿cuál es “mejor”?
  Ninguna de las dos opciones es universal; SYBR™ es rápido y económico para cribados monodiana, mientras que TaqMan™ ofrece mayor especificidad y una multiplexación más nítida. Si observa picos de fusión inespecíficos con SYBR™, confirme los cebadores o utilice la química basada en sondas.

• ¿Estos kits son RUO o IVD?
  La mayoría de los productos mencionados anteriormente son solo para uso en investigación, a menos que Thermo Fisher indique específicamente una variante de diagnóstico in vitro (IVD) en la ficha del producto. Consulte siempre las instrucciones de uso y el etiquetado en su sistema de calidad antes de su uso clínico. (Consulte las fichas de producto mencionadas anteriormente).

Solicite una cotización y soporte técnico de Iright

Solicitar productos químicos debe ser sencillo y trazable. Utilice el botón de cotización o envíe su lista de SKU; le enviaremos la disponibilidad, los plazos de entrega y el paquete de documentación (ficha técnica, instrucciones de uso, SDS y certificado de análisis, si corresponde). Si necesita sustituciones o asesoramiento sobre automatización, indíquenos su instrumento y su capacidad de procesamiento y le propondremos alternativas compatibles.